拉米夫定治疗前后YMDD变异及HBVDNA水平相关性分析.docVIP

拉米夫定治疗前后YMDD变异及HBVDNA水平相关性分析 　【摘要】 目的：通过对慢性乙型肝炎(CHB)患者血液中HBVDNA、谷丙转氨酶(ALT)、r谷氨酰转移酶(rGT)的检测，了解CHB患者经拉米夫定(3TC)治疗前后HBVYMDD变异情况，分析HBVYMDD变异与HBVDNA、ALT、rGT相关情况，探讨3TC治疗CHB的效果以寻找最佳治疗方案。方法：对71例治疗前CHB患者，检测HBVYMDD变异株；选择64例HBVYMDD的CHB患者经治疗1年后，检测HBVYMDD变异株；选择36例患者经治疗后仍然是YMDD；13例经治疗后由YMDD变为YIDD；5例治疗后由YMDD变为YVDD的；9例经治疗后由YMDD变异为YMDD+YVDD混和型的CHB进行检测HBVDNA、ALT、rGT含量。结果：71例CHB用3TC治疗前已有7例存在变异现象，其中2例是YVDD型；3例是YIDD型；2例是YMDD+ YVDD混合型；64例治疗前为YMDD型的患者，用3TC治疗后36例没有变异、5例变异为YVDD、13例变异为YIDD、9例变异为YMDD+YVDD、1例变异为YMDD+YIDD；36例治疗前后DNA没有变异的CHB，治疗前后的HBVDNA、ALT、rGT含量差异有显著意义；13例治疗后由YMDD变为YIDD，治疗前后的HBVDNA含量差异有显著性，而ALT、rGT含量在治疗前后差异无显著意义；5例治疗后由YMDD变为YVDD和9例经治疗后由YMDD变异为YMDD+YVDD混和型，治疗前后HBVDNA、ALT、rGT含量差异无显著意义。结论：CHB用3TC治疗前已经存在着9.85%变异率。64例YMDD用3TC治疗1年后，有43.75%发生变异，变异的类型以YIDD为主。HBVYMDD没有变异时，经3TC治疗CHB后患者的HBVDNA 、ALT、rGT含量比治疗前有较大降低，效果明显。YMDD变异为YIDD时，经治疗后患者血液中的HBVDNA含量比治疗前有较大降低，而血液中ALT、rGT含量比治疗前降低不大。YMDD变为YVDD时，其血液中的HBVDNA量高于治疗前，ALT、rGT含量比治疗前降低不大。YMDD变为YMDD+YVDD混和型时，经治后CHB患者血液中的HBVDNA量比治疗前稍高，ALT、rGT含量比治疗后降低不大。 【关键词】 拉米夫定；HBVYMDD变异株；HBVDNA；谷丙转氨酶；、r谷氨酰转移酶 核苷类药物拉米夫定(3TC)治疗慢性乙型肝炎(CHB)过程中，HBVDNA聚合酶活性区(P基因区)的YMDD基序中的甲硫氨酸密码子(M)易变为异亮氨酸(YMDD→YIDD)或缬氨酸(YMDD→YVDD)，这两种变异均导致3TC与聚合酶亲和力的下降或消失［1］，从而影响治疗效果。为探讨惠州地区CHB患者在3TC治疗前和治疗后YMDD变异情况，分析治疗1年后YMDD变异与患者血液中HBVDNA、谷丙转氨酶(ALT)、r谷氨酰转移酶(rGT)含量相关性，我们对治疗前后的71例患者CHB进行了HBVYMDD变异株和HBVDNA、ALT、rGT含量检测，现报告如下。 　　1 材料与方法 　　1.1 病例选择 　　调查对象为2005年6月至2006年8月在惠州市中心人民医院传染科住院及门诊就诊的CHB患者71例，其中男59例，女12例，年龄18岁~67岁，平均年龄36岁。诊断标准符合2000年9月(西安)第十次全国病毒性肝炎与肝病学术会议修订的病毒性肝炎防治方案［2］。对71例CHB患者用3TC(100 mg/d)治疗前HBVYMDD变异株检测，分析比较经治疗1年后的HBVYMDD变异株与HBVDNA、ALT、rGT含量情况。 　　1.2 血清HBVYMDD变异株检测 　　应用 PCR熔解曲线法，采用Light Cycler荧光PCR仪和分析软件，检测HBVYMDD突变型核酸，检测试剂盒由深圳匹基生物工程股份有限公司提供。具体操作过程严格按说明书进行。 　　1.3 血清HBV 　　DNA定量测定 应用PCR熔解曲线法，采用Light Cycler荧光PCR仪和分析软件，测定HBVDNA 含量，试剂盒由深圳匹基生物工程股份有限公司提供，严格按说明书操作，检测灵敏度为1　000拷贝/ml。 　　1.4 ALT、rGT含量的检测 　　ALT采用赖氏法检测，rGT采用酶法检测，都是使用OLMPusAu 600仪器检测，试剂由中生北控生物科技股份有限公司提供。 　　1.5 统计学处理 　　描述性分析，P检验。 　　2 结果 　　2.1 71例CHB用3TC治疗前的HBVYMDD检测结果 　　　YMDD型64例占90.14%(64/71)