溶瘤腺病毒治疗前列腺癌的临床研究综述.docVIP

　　溶瘤腺病毒治疗前列腺癌的临床研究综述 　　前列腺癌在欧美为男性发病率最高， 死亡率居第 2 位的恶性肿瘤。 近年来我国前列腺癌呈现急剧增加的趋势。 由于我国尚未普及以前列腺特异性抗原（PSA）为基础的人群筛查，约 70%患者在就诊时已处于进展期或转移性癌[1]. 早期局限性前列腺癌多采用根治性治疗，如根治性手术、放疗、离子植入、高能超声聚焦等。 根治性前列腺切除术被认为是治疗局限性前列腺癌最有效的手段， 但早期局限性前列腺癌术后仍有约 35%患者出现生化复发以及肿瘤转移，局部进展期前列腺癌约 50%在治疗后会出现生化复发和肿瘤转移[2]. 转移性前列腺癌 5 年生存率约 28%[3]. 转移性前列腺癌患者大多使用挽救性治疗如内分泌治疗、 化疗等延长生存时间和缓解症状。但内分泌治疗只是在一定时间内有效，所有患者最终会发展为去势抵抗性前列腺癌。 多西他赛为基础的化疗药物可改善去势抵抗性前列腺患者的生存，但化疗耐药最终导致化疗失败[4,5]. 近年来，随着前列腺癌去势抵抗的机制以及对雄激素受体通路的研究进展， 开发了抑制细胞内雄激素合成的药物如阿比特龙[6]和非甾体抗雄激素新药恩杂鲁胺（enza-lutamide）[7], 但这些制剂只能在一定程度上延缓疾病进展，最终会出现耐药导致疾病进展致患者死亡。 　　为了提高前列腺癌的治疗效果和改善患者的预后， 新的治疗手段包括溶瘤腺病毒疗法正在不断探索[8]. 溶瘤腺病毒是一种新型抗癌制剂，腺病毒经过基因改造后可以选择性地在肿瘤细胞内复制并破坏肿瘤，而对正常细胞伤害较小。溶瘤腺病毒从基础研究进入临床试验均显示了其安全性， 病毒基因不会整合至宿主细胞的基因组， 腺病毒基因改造操作容易， 肿瘤细胞具有多个基因的突变恰恰是溶瘤腺病毒的理想靶向。另外，对病毒基因进行修饰可以增强病毒感染、复制、传播及宿主的免疫逃逸能力，从而增强溶瘤腺病毒的抗肿瘤效果， 溶瘤腺病毒联合其他治疗方法如化疗、放疗、基因治疗和免疫治疗等可提高疗效。因此，溶瘤腺病毒被认为是治疗肿瘤有前途的手段之一。 　　1 溶瘤腺病毒肿瘤选择性复制机制 　　腺病毒治疗肿瘤源于 20 世纪 50 年代[9],采用野生型腺病毒治疗肿瘤，虽然显示了一定的疗效，但野生型腺病毒既可以在肿瘤细胞内复制， 也可以在正常细胞内复制并伤害正常细胞， 病毒对正常细胞的伤害导致了严重的不良反应， 因而难以在临床上推广。 随着分子生物学的不断发展以及对腺病毒结构和功能的研究，对腺病毒进行基因改造修饰，限制病毒在正常细胞内的复制， 提高病毒对肿瘤组织的特异性。 理想的治疗肿瘤的腺病毒应该具备肿瘤细胞的选择性或特异性，而正常细胞不受伤害的特点。 　　目前有两种方法可以限制腺病毒在正常细胞内的复制：一种方法是对病毒进行基因修饰改造，消除病毒基因编码的蛋白与正常细胞蛋白的结合， 拆除了腺病毒在正常细胞内复制的必要条件从而限制了病毒在正常细胞内的复制； 另一种方法是在腺病毒基因内插入编码肿瘤细胞特异性蛋白的基因启动子来驱动病毒基因的表达， 使病毒选择性地在表达某种特异性蛋白的肿瘤细胞内复制并破坏肿瘤[10]. 　　腺病毒的复制需要细胞周期进入 S 期， 野生型腺病毒感染细胞后，其早期蛋白 E1A 与宿主细胞的Rb 蛋白结合，激活 E2F 转录因子，迫使细胞周期进入 S 期，从而为腺病毒的复制提供了良好的环境。但是随着 E2F 的激活，p53 也被激活了。 p53 蛋白使细胞周期阻止在 G1期或诱导细胞凋亡，从而限制了病毒复制。 然而腺病毒的 E1B55KD 蛋白可以结合并使 p53 蛋白失活，最终使细胞周期进入 S 期，从而使腺病毒能够在宿主细胞内复制。 为了阻止腺病毒在正常细胞内的复制，对腺病毒进行基因修饰改造，消除腺病毒 E1B55KD,丧失了其与细胞 p53 蛋白结合的能力，p53 蛋白可正常发挥作用阻止细胞周期进展，限制了病毒在正常细胞内复制。 同样，对腺病毒E1A 区与 Rb 蛋白结合位点基因施行消除或替换突变，消除 E1A 与 Rb 蛋白的结合能力，不能激活 E2F转录因子，防止了细胞进入 S 期，限制了病毒复制。 　　经过这样修饰过的 E1A 或/和 E1B 突变腺病毒即使感染正常细胞由于不能改变细胞周期， 缺乏腺病毒复制的必要条件，因而不能在正常细胞内复制，避免了病毒对正常细胞的伤害， 从而提高了腺病毒治疗肿瘤的安全性。 但是，对腺病毒的 E1A 或/和 E1B 基因进行修饰对肿瘤细胞是不重要的， 因为大多数肿瘤包括前列腺癌， 具有广泛的细胞周期调控因子的基因突变，包括 Rb、p16、Bcl-2、p53、p27 等，致使细胞周期失控，有利于腺病毒复制。 因此，前列腺癌适于溶瘤腺病毒治疗。 　　另一种战略是在腺病毒基因上插入组织或肿瘤特异性的启动子来控制病毒