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坝lⅢ冗生毕业论卫 J十参.Iq.t浊对人鼠急件腆腺髭胰腺Jf;!咆细胞掏r。的攀,雌{
腺炎中观察到大量的胰腺纠胞凋I:,而在重症胰腺炎则观察到广泛的肤腺细胞坏
死。细胞凋亡与急性胰腺炎严重程度呈负相关,表明细胞凋亡可能赴对胰腺损伤
的有利反应。诱导细胞凋t:可减轻急性胰腺炎的严重程度,而抑制细胞凋亡加重
急性胰腺炎的病变程度11}1引,凋亡能影响SAP的发病率和死亡率【17】。
如果细胞以坏死方式死亡,会伴随剧烈的炎症反应,产生“瀑布样效应”,导致
胰腺和全身多脏器系统的广泛损害,临床上表现为重症急性胰腺炎。而晾泡细胞
以凋亡方式死亡时,由于伴随的炎症很轻微甚至不引起炎症反应,不会发生“瀑
布样效应”,因此造成的组织损伤比较小,临床上表现为轻型急性胰腺炎【lsl。因
此,在急性胰腺炎时,诱导胰腺腺泡细胞凋亡可能成为治疗急性胰腺炎的一种方
式,然而在这方面却缺乏研究。
丹参注射液作为传统中药丹参的提取物被广泛用于临床,其主要药理作用有
抑菌、自由基清除,抑制脂质过氧化及延长凝血酶时间、凝血酶原时间和连续凝
血酶时间、抑制血小板聚集、加速微循环血流、耐缺氧等作用【191。研究表明丹参
能够抑制缺血再灌注的鼠心肌细胞的凋亡【捌,而Oh[2al等的研究也发现丹参对阻
塞性黄疸引起的肝细胞凋亡具有抑制作用。但有的研究却发现丹参对细胞凋亡有
促进作用,可以诱导细胞凋亡∞埘。虽然丹参被广泛用于胰腺炎的治疗,但其治
疗机理仍不完全清楚,特别是对急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡是否有影响未见报
道。本实验就丹参对急性胰腺炎时胰腺腺泡细胞凋亡的影响进行研究,以进一步
揭示其治疗机理。
,
嘶!t·耐f究生毕业论土 蚪参仆qt液计k鼠急r}艟朦炎JIl;隙腺泡绑胞弼f’竹彬响
实验材料与方法
1.实验材料
1.1材料与设备
g
由贵阳医学院实验动物中心提供。动物许可证号:(黔)202-0001。
2 OLYMPUSCKX31.A12PHP显微镜
3 OLYMPUSAU
800全自动生化分析仪
4海信BCD-200A型冰箱
5LEICAEG’1140石蜡包埋机
6LEICARM2145切片机
7Biomias99图象分析系统由四川大学图象图形研究所研制
8J阡2型托盘天平 江苏常熟衡器厂
9LGRl0..4.2低温离心机 北京医用离心机厂
10
78.1磁力搅拌器 上海浦东物理光学仪器厂
11TG.328A电子分析天平 上海天平仪器厂
12DGX09053B.1电热鼓风干燥箱上海福玛实验设备有限公司
13 PH计
PHDz-01 上海大普仪器有限公司
1.2试剂
1.脱氧胆酸钠由中国医药集团上海化学试剂公司进口分装
2.丹参注射液购自成都天台山制药有限公司(批号050101) .
3.淀粉酶试剂盒购自上海科华生物工程股份有限公司
4.凋亡检测试剂盒(末端原位标记法)购自武汉博士德生物技术有限
公司
.
5.Bax检测试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司
6.二氨基联苯胺(DAB)购自武汉博士德生物工程有限公司
7.链酶亲和素一过氧化物酶(SABC)免疫组化染色试剂盒购自武汉博士
德生物工程有限公司
8.粘片剂APES购自武汉博士德公司
9.1.5%脱氧胆酸钠:1.5克脱氧胆酸钠溶于100毫升新鲜蒸馏水
8
竺!!丝!!,±兰些垒兰 竺兰!!!!丝型叁墼墨堡型:鳖叁壁坚竖塑型些型主塑丝堕
lO.多聚甲醛 火津市科密欧化学试NJr发中心
11.磷酸氢二钠 尺津市大茂化学试剂厂
12.磷酸二氢钠
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