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第42 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究报告 第11 期 2014 年11 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1592 ~1597 DOI:10.11895/j.issn.0253-3820.140453 量子点标记免疫层析技术检测血液中的降钙素原 1 2 *3 余皓 徐良 漆晓萍 1(深圳职业技术学院,医疗电子专业,深圳518055) 2 3 (深圳市药品检验所,深圳518057) (深圳市南山区人民医院,深圳518052) 摘 要 为了快速定量检测血液中降钙素原(Procalcitonin,PCT)含量,首先制备CdSe/ZnS量子点,再将量子 点标记抗抗钙素单抗,标记单抗后量子点荧光发射峰从620nm红移至625nm,峰形保持良好。 以制作的量 子点标记免疫层析试纸条及其相应荧光测定系统。 因减少单抗用量可降低试纸条成本,本研究采用结合垫上 喷涂适量量子点,标记单抗并仅有检测线的结构。 通过检测信噪比,优化此试纸条的参数。 本研究的量子点 荧光标记试纸条及其配套测定系统可在20min 内快速检测PCT,定量检测线性范围0.2~100μg/L,灵敏度 达到0.1μg/L。22份血液样本检测结果与目前商品设备检测结果的Pearson相关系数为0.9995,K-S检验的 Sig为1.0,说明两种检测方法的一致性。 快速定量检测PCT具有定量测量细菌性感染、临床指导抗生素合理 应用的重要意义。 关键词 量子点;免疫层析;降钙素原;血液;试纸条 1 引 言 降钙素原(Procalcitonin,PCT)是一种内源性非类固醇类抗炎物质,在细菌感染时诱导产生,细菌内 [1] 毒素是诱导PCT产生的最主要刺激因子 。 生理情况下,健康人的血液中PCT浓度小于0.2μg/L,通 常不会被检测到。 细菌感染时,除甲状腺外,肝脏的巨噬细胞和单核细胞、肺和肠道组织的淋巴细胞及 内分泌细胞都能合成分泌PCT,此时血液中的PCT水平会明显升高,且随着感染进展或控制而持续升 [2] 高或逐渐下降 。 [3] PCT作为生物标志物检测细菌感染的参考提示包括 :在正常人血液中PCT浓度0.25μg/L;轻 度或局部细菌感染的病人血液中PCT浓度为0.25~0.5μg/L;可能存在感染或败血症,需要动态观察 的病人血液中PCT含量为0.5~1.0μg/L;存在系统的细菌感染,需要密切检测、必要时可给予特异抗 感染治疗和支持治疗的病人的血液中PCT含量为1~100μg/L,甚至更多。 与其它传统实验室指标,如 白细胞计数、C-反应蛋白(CRP)水平相比,PCT对于诊断细菌感染性疾病具有更好的特异性。 [4] 目前,检测PCT常见半定量法和定量法。 半定量法多采用胶体金免疫层析法 ,通过观察胶体金 免疫层析试纸条上检测线的颜色深浅,可以将血清中PCT 的含量分大致4 个等级。 定量法目前包括免 [5,6] [7,8] 疫荧光法 、免疫化学发光法 等。 相比而言,免疫荧光法、免疫化学发光法等能够定量检测PCT 的 含量,但是检测设备操作复杂且昂贵,检测费用高,耗时长。 而胶体金免疫层析法检测方