白莲腐败病病原菌的分离鉴定.pdfVIP

畏 盖 象 (下半月刊) J0URNALOFCHANGJIANGVEGETABLES 一92一 DOI：IO．3865j／．issn．1001—3547．2013．18．029 白莲腐败病病原菌的分离鉴定 胡长志 ，孙晓棠 ，谢克强 ，蒋军喜 ，郑兴汶 ，崔汝强 (1．江西农业大学农学院，南昌，330045；2．江西广昌白莲产业发展局) 摘 要：莲腐败病是白莲种植区发生最普遍、为害最严重的病害之一。本试验对发病 白莲上的病原茵进行分离鉴定。 该病原分离物在PSA培养基上气生茵丝由白色渐变成深紫色，并产生大小两种孢子。大型分生孢子镰刀形，无色，稍 呈弯曲，两端尖细，大小为(39．1—55．2)1．zmx(2．8～4．6)I*m，多为 3个隔膜，少部分为 1～2隔或4～5隔；小型分生孢子椭 圆形，无色，无隔膜，大小为(5．0～9．2)p,mx(2．0～3．5),Izm。致病性测定表明分离物能100％~l起白莲出现典型的白莲腐 败病的症状。ITS1／ITS4的PCR扩增产物与GenBank中Fusariumoxyspomm￡sp．nelumbicola的序列同源性为99％。 研究结果表明，分离到的病原物为尖孢镰刀茵莲专化型 Foxysporum￡sp．nelumbicola。 关键词：莲腐败病 ；尖孢镰刀菌莲专化型；鉴定 、 中图分类号：$436．45 文献标识码：A 文章编号：1001—3547(2013)18-0092—03 白莲 (NelumbonuciferaGaertn)是一种水生经 物学技术对该病害的病原菌进行了鉴定。 济作物，在我国分布很广，南北都有种植。改革开放 1 材料与方法 后 ，特别是近些年来，我国子莲产业发展迅速。据统 计 ，全国子莲种植面积 10万hm 以上 ，是我国种植 1．1 病菌的分离鉴定 面积最大的水生作物之一。莲腐败病是莲种植区发 2011年 7月从江西省广昌县采集具有典型 白 生最普遍、为害严重的病害之一，在生长期和莲藕贮 莲腐败病症状的病株，参照刘国安21『的方法取病株 藏期均可发病，分布广阔，全国各莲区均有发生f”。莲 莲鞭、节和须根进行病菌分离 ．在马铃薯蔗糖琼脂 腐败病属土传病害。病菌往往造成藕鞭、藕节、藕根 培养基(PSA)平板上28℃明暗 12h交替培养：待菌 腐烂，同时地上部分的叶、花也会萎蔫黄枯，发病严 落生长后取先端菌丝进一步纯化。观察菌落形态、 重的整株枯死2[1。 分生孢子产生及其形态和大小。 江西 白莲主产区每年有 30％一70％的莲发生莲 12 致病性测定 腐败病，10％～15％的严重发生莲腐败病 ，颗粒无收， 将纯化的病菌于PSB液体培养基中培养制成 莲农损失惨重。目前对该病害的致病机理、病害发 10的孢子菌悬液针刺接种到莲籽育出2a生健康 生流行规律及有效的防治措施等鲜有报道，为病害 的莲藕和莲鞭上 。莲藕保湿24h后栽回灭菌土中， 的防治带来了较大的困难。莲腐败病已成为阻碍 白 莲鞭于28~(2光照培养箱中保湿：以无菌水为对照接 莲产业持续发展的一大障碍。本试验以广昌发病 白 种2[13j。＼、 1．3 DNA的提取 莲为材料结合传统的植物病原鉴定方法和分子生 将分离的经致病性测定的病原菌采用PSA液 体培养基在 28~C120r／min培养