肺癌患者T细胞亚群与D—二聚体和临床分期相关性研究.docVIP

肺癌患者T细胞亚群与D—二聚体和临床分期相关性研究 　　[摘要] 目的 研究肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群、D-二聚体与临床分期、临床病理分级之间的关系。 方法 运用流式细胞术和免疫比浊法分别测定80例肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群比例和D-二聚体含量。 结果 临床分期Ⅲ～Ⅳ期（晚期）外周血中CD4+（%）比例较临床Ⅰ～Ⅱ期（早期）低（P 0.05）。 结论 肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和D-二聚体含量与肺癌的临床分期早晚相关，与肺癌的病理类型和分化级别无关，提示可作为肺癌患者分期的参考指标。 [关键词] T淋巴细胞；D-二聚体；肺癌；临床分期 [中图分类号] R734.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）22-0058-02 肿瘤的发生、发展及转移与肿瘤微环境密切相关。而微环境内执行细胞免疫功能主要依赖于T淋巴细胞。正常情况下，T细胞及亚群的数目处于相对平衡状态，维持免疫功能稳定；若T细胞总数或者CD4+/CD8+T细胞比值发生异常时，即可视为免疫调节紊乱，宿主免疫功能低下或受抑制，易发生肿瘤或自身免疫疾病[1]。肿瘤抗原识别通过CD4+完成，肺癌患者体内CD4+细胞数减少，CD8+细胞数增多，则有利于肿瘤增长。而CD4+/CD8+比值增加，会抑制肿瘤增殖。故检测肺癌患者外周血T细胞亚群，对于判断肿瘤患者的免疫功能有一定价值，特别是对监视肿瘤复发、提高疗效、估计预后均有一定的临床意义[2]。 D-二聚体是纤维蛋白单体经活化的因子交联后再经纤溶酶水解所产生的一种特异降解产物，有报道在肺癌[3]、肝癌[4]、结直肠癌[5]等恶性肿瘤中均有较高的表达。因而近年来有关恶性肿瘤患者D-二聚体水平的变化引起了许多学者的关注，D-二聚体的水平可能与肿瘤的临床分期有关。本文通过测定不同肺癌分期T细胞亚群的比例、D-二聚体的含量，分析两者在肺癌临床分期、病理类型及病理分化级别中的意义，以期为肺癌诊断和治疗提供理论支持。 1 资料与方法 1.1 一般资料 80例肺癌患者为2011年7月～2012年7月在我院肿瘤科或胸外科住院患者，其中男43例，女37例，年龄42～85岁，中位年龄59.4岁。所有患者均为经支气管镜或手术病理证实的初诊肺癌患者，其中支气管镜活检确诊32例，手术病理48例，根据2009年国际抗癌联盟（UICC）的TNM分期标准，其中Ⅰ期患者24例、Ⅱ期患者21例、Ⅲ期患者25例、Ⅳ期患者10例。所有患者均为初治患者，不伴有免疫缺陷性疾病、器官移植或其他系统的肿瘤，近3个月未使用过免疫增强或抑制的药物及其他生物治疗。 1.2 主要试剂与仪器 小鼠抗人IgG-PE、IgG-FITC、CD4+-FITC、CD8+-FITC、CD4+-PE、CD8+-PE为美国CST公司生产，流式细胞仪为美国COULER EPICS XL，SIEMENS公司D-二聚体试剂盒，SYSMEX CA1500 全自动生化分析仪。 1.3 方法 收集治疗前患者清晨空腹静脉血2 mL，分别检测患者治疗前血浆D-二聚体水平及T淋巴细胞亚群的情况。采用SYSMEX CA1500全自动生化分析仪，D-二聚体试剂盒，应用免疫比浊法检测研究对象血浆D-二聚体含量。用流式细胞分析法测定T细胞亚群，方法为：用PE荧光标记的单克隆抗体20 μL加入EDTA抗凝血100 μL发生抗原抗体反应，溶血剂2 mL破坏红细胞，磷酸盐缓冲液洗涤，固定液固定后用COULER EPICS XL流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞。 1.4 统计学方法 计量资料用均数±标准差（x±s）表示，并用SPSS 13.0软件包对T淋巴细胞亚群和血清D-二聚体含量与肺癌临床分期的关系进行两独立样本的t检验， T淋巴细胞亚群和血清D-二聚体含量与病理分化级别的关系采用独立样本t检验，以P 　　D-二聚体作为交联纤维蛋白的降解产物，是继发性纤溶的特异性分子标志物之一，对恶性肿瘤的观测有重要临床价值。有报道称约90%以上转移癌和一半以上的原发癌存在凝血参数异常，研究发现D-二聚体含量与胃癌、乳腺癌、肠癌的TNM分期有关[9]。我们的数据显示血清中D-二聚体与肺癌患者的TNM分期级别高低有关，临床晚期较于早期的外周血D-二聚体含量明显增高，提示可以利用D-二聚体含量来检测肿瘤的存在，同时同一病理类型（鳞癌或腺癌）分化级别与D-二聚体含量差异无统计学意义，不同病理类型同一分化级别的肿瘤D-二聚体的含量亦无显著性差异，说明D-二聚体的含量与肺癌的分期级别高低有关而与肺癌病理类型无关。 本研究发现肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和血清D-二聚体含量与临床分期级别高低有关，同时T淋巴细胞亚群和血清D-二聚体含量