响应面法优化固定化酶改善酸法大豆浓缩蛋白凝胶性的研究.pdfVIP

响应面法优化固定化酶改善酸法大豆浓缩蛋白凝胶性的研究.pdf

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第7期 总第 193期 农业科技与装备 No.7TotalNO.193 2010年 7月 AgriculturalScienceTechnology andEquipment ju1.2010 响应面法优化固定化酶改善酸法大豆浓缩 蛋白凝胶性的研究 张 莹.张春红 (沈阳农业大学食品学院,沈阳 110161) 摘要:利用固定化谷氨酰胺转胺酶(MTG)对酸法大豆浓缩蛋白(sPc)进行改性,采用响应面法优化改性的工艺条件。结果表明,当 固定化MTG添加量3.84U/g、反应温度49.57oC,pH值6.03、反应时间2.04h时,响应面优化后的SPC凝胶性为7.33kcp,比未改 性时提高27.26%。 关键词:酸法大豆浓缩蛋白;固定化MTG;凝胶性;响应面分析 · 中图分类号:TS214.2 文献标识码:A 文章编号:1674—1161(2010)07—0020—04 酸法大豆浓缩蛋 白(SPC)是一种功能性大豆浓 滤一载体一加酶反应一4℃过夜保存一抽滤清洗一 缩蛋 白,是蛋 白质含量不少于 60%的大豆蛋 白产品, 固定化酶[引。 与大豆分离蛋白相比具有价格优势。提高大豆浓缩蛋 2)MTG酶活力的测定:比色法[。 白的功能性质尤其是其凝胶性。应用于肉制品加工中 3)SPC凝胶性的测定 :RVA一3D型快速粘度分 不但可以降低产品的成本,更可以提高产品的营养价 析仪。 值。谷氨酰胺转胺酶(MTG)是一种蛋白质聚合酶,能 2 结果与分析 够催化蛋 白质分子之间发生交联反应,大幅度增加蛋 2。1 固定化MTG操作稳定性 白质分子量Il-。本试验主要采用响应面法优化 了固 用pH为 6.0的缓冲液浸泡固定化 MTG,在 50 定化MTG改性 SPC的工艺条件 。为扩大大豆浓缩蛋 ℃放置 2h(模拟与底物反应),重复测定固定化酶的 白的应用范围提供一定的理论基础和实践经验。 酶活。从图1可以看出,固定化酶连续反应 10次,酶 1 材料与方法 活仍维持在75%以上。 1.1 主要材料 12O 大豆浓缩蛋 白:山东新嘉华集团;谷氨酰胺转胺 10O 酶:江苏一鸣精细化工有限公司;壳聚糖:上海伯奥生 80 物技术科技有限公司;其他试剂均为分析纯。 60 谧 40 1.2 主要仪器 盔 20 RVA一3D型快速粘度分析仪:澳大利亚Newport * 0 公司;PHS一3C精密 pH计:上海雷磁仪器厂;UV2265 紫外可见分光光度计:日本岛津;磁力恒温搅拌器:上 海南江电讯器材厂;SHY22A水浴恒温振摇器:江苏 图 1 固定化 MTG 的操作稳定性 丹阳门科教仪器厂。 Hgure1 OperationstabilityofimmobilizationMTG 1.3 试验方法 2.2 响应面分析法对 固定化 MTG改性 SPC工艺 1)固定化MTG的制备:壳聚糖一壳聚糖溶液+ 的优化 凝结剂一壳聚糖微球一戊二醛交联反应一清洗抽 在单因素试验的基础上,采用响应面设计试验,

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