以tuf基因为靶标的5种16srⅰ组植原体环介导恒温扩增技术.pdfVIP

第 53 卷 第 8 期 林 业 科 学 Vol. 53 ，No. 8 2 0 1 7 8 SCIENTIA SILVAE SINICAE Aug． ， 年 月 2 0 1 7 doi :10．11707 / j．1001-7488 以 tuf 基 因为靶标 的 5 种 16Sr Ⅰ组植 原体 环介导恒温扩增技术* 王圣洁1 王胜坤2 林彩丽1 于少帅1 汪来发1 朴春根1 郭 民伟1 田国忠1 (1． 中国林业科学研究院森林生态 环 境 与保护研究 所 国家林业局 森林 保护 学 重 点实验 室 北京 100091 ; 2． 中国林业科学研究院热带林业研究所 广 州 510520 ) : 【 】 16Sr ， 16Sr 摘 要 目的 建 立一 种 能够 特 异 性 检 测和鉴定 Ⅰ组 植 原 体 的环 介 导 恒 温 扩 增 技 术 实 现 Ⅰ组 植 原 体 的快速 检 测。 【 】 tuf ， ， LAMP ， 方 法 以植 原体 基 因作 为靶 标 通 过 序 列 比对 设计 多组 具有特 异 性的 引物 组 筛 选 出 一 套 适 用于 16Sr Ⅰ组植 原体 的特异 性 检 测体 系 。 以 16Sr Ⅱ组 、16Sr Ⅴ组 、16Sr ⅩⅨ组 植 原 体 样 品按 照此 检 测体 系进 ， ; PCR LAMP ， 。 行 反应 来 验 证 其特 异 性 同时将稀 释 后 的感病 组 织 样 品 同步 进 行 和 检 测 以确 定 其 检 测 灵 敏 度 对 6 9 ， 。 【 】 16Sr -LAMP 来 自不 同省 市 的 份 田间样 品 以及 份 组培 样 品进 行 检 测 以验 证 其 检 测 的稳 定 性 结 果 Ⅰ 在 恒 63 ℃ 40 min ， 5 、 、 、 温 条件下 内完成扩 增 能检 测 种分别 引起泡 桐 丛 枝 苦楝丛 枝 桑树 萎缩 莴苣黄 化 和长 春 花 绿变病 16Sr ，