青蒿素增敏复方抑制肿瘤细胞增殖及延缓荷瘤裸鼠移植肿瘤生长的研究.pdf

广州 中医药大学学报 2010年 5月第27卷第 3期 254 JournalofGuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicine May2010，Vo1．27，No．3 青蒿素增敏复方抑制肿瘤细胞增殖 及延缓荷瘤裸 鼠移植肿瘤生长的研究 黄 玲 ， 张平祖 ， 曾庆平 (1．广州中医药大学学报编辑部，广东广州 510405；2．广州中医药大学热带医学研究所，广东广州 510405) 摘要：【目的】提高青蒿素抗肿瘤效率，阐明青蒿素增敏复方的抑瘤增敏机理。【方法】采用四甲基偶氮唑盐 (Mrr)法测 定各药物对人肝癌细胞株 HepG2细胞的生长抑制率；经皮下接种HepG2细胞进行荷瘤裸 鼠造模，测定给药 15d后瘤体质 量，计算抑瘤率。 【结果】青蒿琥酯配伍马来酸二乙酯、巯基琥珀酸和氨基三唑后，肿瘤细胞的生长抑制率较相 同浓度的 青蒿琥酯单方高43．84％，抑瘤率较青蒿琥酯单方提高近3倍。HepG2细胞中抗氧化剂含量及抗氧化酶活性测定结果表明， 空白组的测定值均高于单方组和复方组，而复方组的测定值低于单方组。 【结论】青蒿素增敏复方可能通过降低抗氧化剂 含量及抑制抗氧化酶活性发挥抗肿瘤增敏作用。 关键词：青蒿素／药理学； 肿瘤／中西结合疗法； 增敏； 细胞培养； 疾病模型，动物； 裸鼠 中图分类号：R285．5 文献标志码：A 文章编号：1007—3213 (2010)03—0254—40 青蒿素是从中药青蒿 (ArtemisiaannuaL．)中 品，氨基三唑为上海精纯试剂有限公司产品，5．氟 提取的抗疟倍半萜过氧化内酯，其人工半合成衍生 尿嘧啶 (5一FU)、四甲基偶氮唑盐 (MIT)、二 甲 物青蒿琥酯、双氢青蒿素、蒿 甲醚等已广泛用于疟 基亚砜 (DMSO)均购 自Sigma公司，DMEM培养 疾治疗。在青蒿素抗疟研究中发现，阿霉素、维生 基 (低糖)购 自Gibco公司，胰酶、胎牛血清均购 素B2和甲萘酯等 自由基引发剂 (促氧化剂)与青 自TBD公司，蛋白质、GSH含量及 GSH．PX、CAT 蒿素有协同抗疟作用，而生育酚、抗坏血酸、谷胱 活性测定试剂盒均由南京建成生物工程研究所生产 甘肽、二硫苏糖醇等 自由基清除剂 (抗氧化剂 ) (批号。 则能降低青蒿素的抗疟作用 ¨。当疟原虫的过氧化 1．2 实验动物和肿瘤细胞株 SPF级 BALB／c—llU 物酶和过氧化氢酶受到抑制后，青蒿素的疗效则明 裸 鼠，雌性，4周龄 ，体质量 16～18g，由南方医 显提高 J。因此，自由基引发剂增加或 自由基清除 科大学实验动物 中心提供，合格证号：SCXK粤 剂减少对青蒿素的抗疟活性都有增效作用。 2006-0015。人肝癌HepG2细胞株由中山大学提供。 为提高青蒿素的抗肿瘤效果，本研究以谷胱甘 1．3 主要仪器 CK40．F200型倒 置 显微镜 肽 (GSH)耗竭剂马来酸二乙酯、谷胱甘肽过氧化 (Olympus公 司)，HWO301T—VBA 型 CO2培养箱 物酶 (GSH—PX)抑制剂巯基琥珀酸、过氧化氢酶 (Harris公司)，LegendMicro17／17R21／21R型高 (CAT)抑制剂氨基三唑等 自由基清除剂与青蒿琥 速冷冻离心机 (赛默飞世尔科技 中国有限公司)， 酯组成抗肿瘤增敏复方，通过体外及体内实验 比较 MK3型酶标仪 (热电上海仪器有限公司)，BS124S 复方与单方抑制人肝癌细胞株HepG2增殖及延缓 型电子天平 (赛多利斯科学仪器北京有限公司)， 荷瘤小鼠移植肿瘤生长的效果，并初步阐明青蒿琥 722型可见分光光度计 (上海精密科学仪器有限公 酯增敏复方增强抗肿瘤