现代生物技术细胞工程.ppt

细胞工程的基本原理; 第一节 细胞工程的基本原理;一、细胞工程的内容;细胞工程;二、发展史;三、细胞工程的基本操作;1、无菌操作技术; 无菌操作;2、细胞培养技术;;3、细胞融合技术;; 四、细胞培养技术; 1、微生物细胞培养;1）培养基的组成;1）培养基的组成;1）培养基的组成;1）培养基的组成; 1）培养基的组成;1）培养基的组成;2）培养基的种类;2）培养基的种类; 3）培养方法;2、植物细胞培养;2、植物细胞培养;2、植物细胞培养;2、植物细胞培养;2、植物细胞培养;2、植物细胞培养;2、植物细胞培养;常用的细胞固定化培养系统; 3、动物细胞培养;3、动物细胞培养;3、动物细胞培养;3、动物细胞培养;五、细胞融合技术;五、细胞融合技术;五、细胞融合技术;;五、细胞融合技术;五、细胞融合技术;五、细胞融合技术;五、细胞融合技术;第二节 植物细胞工程;植物细胞工程;;;;;;外植体;;;一、植物组织培养;离体的植物器官、组织或细胞;;;胚 状 体;二、植物细胞培养;;三. 植物细胞杂交（细胞融合）;植物A细胞;(1);白菜;第三节 动物细胞工程;动物细胞工程的应用：生产基因工程药物、单克隆抗体、疫苗等。 主要特点：以工业化为目的，应用动物细胞培养的基本原理，研究生物活细胞为主体的生物反应过程，解决动物细胞培养过程中带有共性和特性的工程技术问题。;动物细胞工程;培养条件：适宜的温度、pH、溶解氧水平 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础;（1）原代培养：以动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织为材料，先用胰蛋白酶等使组织分散成单个细胞，然后配制成一定浓度的细胞悬浮液，放入培养瓶中，在培养箱中培养。 （2）传代培养：随着细胞的生长和增殖，培养瓶中的细胞越来越多，需要定期地用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中培养。;动物胚胎或幼龄动物的组织、器官;动物胚胎或幼龄动物的组织、器官;细胞悬浮液;动物细胞;有关动物细胞培养的几个问题;（1）动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？; 血清是一种很好的营养物质，含 有动物体细胞生长所需要的营养物质，并给动物创造了生活环境。;（2）为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？;（3）为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？;贴壁生长;动物细胞培养技术的应用;培养结果;二、动物细胞融合;细胞A;用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程;动物细胞融合的意义;诱导动物细胞融合的方法;主要用于制备;动物细胞融合最重要的用途;抗原;长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。;（1）提出问题：从动物血清中分离抗体的方法产量低、特异性差、纯度低、反应不够灵敏; 单克隆抗体制备过程：;本过程利用了免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理;细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活;单克隆抗体的应用; 目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。;小结;三、细胞核移植技术;多莉羊的培育过程;黑面绵羊去核卵细胞; 采用此方法可以将两个不同种、属的动物优点集中在一起，产生具有双亲优点的可繁殖的杂种动物。;克隆动物的研究意义;四、动物的胚胎移植;（1）激素促多排卵 （2）体外受精 （3）培育胚胎 （4）胚胎激素处理 （5）胚胎植入母体 ;胚胎移植技术; ①植物组织培养是植物细胞工程技术的基础。 ②动物细胞培养是各种动物细胞工程技术的基础。 ③为达到特定的目的，许多细胞工程技术往往需要同时运用。 ;第四节 微生物细胞工程;一、微生物原生质体融合;微生物原生质体融合;（一）微生物原生质体融合的优势;（一）微生物原生质体融合的优势;（一）微生物原生质体融合的优势;（二）微生物原生质体融合的基本步骤;（2）原生质体制备;（3）原生质体再生;（3）原生质体再生;影响再生的因素;④再生培养基组成 碳源，稳定剂、细胞壁提取物都会影响再生率 ⑤残存菌体的分离 残存菌体必须分离除去 ⑥原生质体密度