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人源蛋白酪氨酸磷酸酶ptp1b功能域及其全酶的-国家药物筛选中心
（ ）
第 卷第 期 河南大学学报 自然科学版
４４ ２ Ｖｏｌ．４４ Ｎｏ．２
年 月 （ ）
２０１４ ３ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｅｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔ ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ Ｍａｒ．２０１４
ｙ
人源蛋白酪氨酸磷酸酶ＰＴＰ１Ｂ功能域及其
全酶的原核表达及活性比较
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庞晓斌 谢欣梅 李晓婷 王守宝 杜冠华
（ ， ；
河南大学药物研究所 河南开封
１． ４７５００４
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中国医学科学院 北京协和医学院药物研究所国家药物筛选中心 北京
２． ＆ １０００５０
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摘 要 通过设计引物 利用 ＲＴ ＰＣＲ从人肝癌细胞 ｈｕｈ７ 中克隆蛋白酪氨酸磷酸酶 ＰＴＰ１Ｂ 全长及功能域ＰＴ
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Ｐｃ的 ｃＤＮＡ序列并连接到 ＧＥＭ Ｔ Ｖｅｃｔｏｒ载体上 测序正确的 ｃＤＮＡ序列连接到表达载体 ＥＴ ３２ａ ＋ 上 分
ｐ － ｐ －
（ ） （ ） ， ２＋
别在大肠杆菌Ｔｒａｎｓｅｔｔａ ＤＥ３ 和 ＢＬ２１ ＤＥ３ 菌株中稳定表达目标蛋白 经 Ｎｉ 亲和柱纯化后目的蛋白达到了
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电泳纯 通过酶促动力学方法分析两种蛋白的体外活性 本实验成功表达了 和 可溶性蛋白 并发现
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