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骨活检塑料包埋切片的探讨 哈尔滨医药2005年第25卷第5期 使用早于主渎数时间的第17～22点检测结果,称为”弹性速 率读数时间FlexRateReadTime”计算出酶活力.同样,在弹 性速率读数时间内的各点结果能否被用来计算ALT活力, 也由仪器的质量控制监测确定.使用弹性速率法测得的酶活 力在报告时带有”Flex”字样,以提醒操作人员注意. 2.2.3质量控制监测:Aeroset的监测系统随时在观察各 ALT反应杯的A340nm是否在0.4～1.5之间.质量控制监 测保证具有高AIT活力样品使底物耗尽,或具有严重溶血, 黄疸或脂血样品使吸光度明显偏高时都不能直接报告检验 结果.这是Aeroset的光度警示.吸光度警示——Aeroset使 用第17～22点检测结果计算前,先确认反应曲线是否线性. 判断原因是:以读数窗内的可接受吸光度值计算酶反应曲线 的斜率,将前3点的斜率与最后3点的斜率作比较,确认可 以计算酶活力的线性区.但是,计算酶活力的反应点不能少 于3点.少于3点的样品说明酶活力过大,弹性速率法也无 ? 39? 法报告结果. 3结果与分析 测定门诊,病房共6857例患者血清中ALT活力,结果 分布为:ALT活力lt;400U/L的为6614份,gt;400U/L的为 243份,gt;800U/i的为129份,gt;4202U/L的为27份.如果 仪器没有弹性速率功能,超过400U/L的样品必须经过稀释 后果做的次数为243次;而使用的弹性速率法,只有对超过 42O2U/L的样品才需要稀释重做,仅为27次.二者相差9倍 (243/27). 4讨论 Aeroset的弹性速率法扩展了检测酶活力的报告范围. 显着减少了稀释重做的频率.节省了从接收样品到发报告的 周转时间.而且减少了试剂和人工的耗费,消除了稀释引入 的误差,使结果的准确性和精密性更加得到保证.因此,弹性 速率法在临床检验工作中有很重要的应用价值. 骨活检塑料包埋切片的探讨 薛苏华朱明月贡月泼 [中图分类号]R446.8[文献标识码] 骨组织传统的病理制片方法是甲醛固定,脱钙,石蜡包 埋切片.HE染色.此法经过脱钙,脱水,加温,浸蜡可使细胞 严重收缩,且HE染色只有二种颜色,使各系统血细胞及其 分化阶段的辩认十分困难.为解决此问题,我们经反复试验, 发现用塑料包埋切片染色,结果甚为满意. 1材料 1.1骨髓活组织及大白鼠胫,腓骨,股骨,椎骨组织. 1.2上海市第六人民医院配制的Hemapun865塑料包埋剂 (32作液——即A液:取Hemapun86510ml,加1安瓿的过氧 化二苯甲酰混匀置4_C冰箱.B液现成的). 2制作 2.1Bouin氏液固定1～3小时,取出后清水冲洗1O分钟. 1n, 2.2梯度酒精脱水,5O_C水浴锅内进行.程度:6O%酒精 1n1n1nn 70酒精8O%酒精95%酒精100无水乙醇 0fit 100%无水乙醇. 2.3甲液浸透1小时. 2.4乙液加3滴混合充分搅匀. 2.5剪1块包埋盒口大小的塑料薄膜盖在液体表面使液面 与空气隔离促进表面聚合. 2.6连包埋盒一起放人4冰箱内过液,第2天移至室温. 组织快恢复室温很快就聚合变硬. 2.7当包埋块表面的包埋剂聚合变硬后,可去掉包埋盒,用 钢锉磨去包埋块底部多余的塑料,用普通切片机及D钨钢刀 作者单位:214041江苏省无锡市第三人民医院 A 最好,切成2～3u切片,放人洁净凉水面上展平.然后贴在载 玻片上,6O～80烤箱内充分烤干. 2.8染色:常规HE染色,HGE(苏木素——Giemsa——伊 红染色),HGF(苏木素——Gjems——酸性器红染色). 3讨论 3.1石蜡包埋活检组织方法,其缺点是对标本处理过程繁 琐,需固定,脱钙,梯度脱水,浸蜡,包埋切片后脱蜡,水化等 一 系列过程,而塑料包埋仅需固定,梯度酒精脱水,低温浸 透,包埋切片步骤,避免脱钙,浸蜡,切片后脱蜡,水化这些对 骨髓活检组织有较大影响. 3.2固定必须迅速,充分,透彻,有利于细胞内水分脱出和 包埋剂浸入,以及细胞对酸硷染料着色.否则,包埋剂不能进 入组织内,导致组织周围包埋剂凝固,而组织内是稀软的,不 能切片.浸透是在包埋前让包埋介质缓慢地渗入组织中去, 以便组织内外的包埋剂同时凝固或聚合,从而达到内外软硬 一 致的目的.反之,无法切片.如果组织块过大,可适当延长 在甲液中的时间. 3.3包埋剂与催化剂比例不当,(催化剂过多时)聚合太快, 组织块可出现周边变硬,中央仍软而不能切片.阻聚剂量太 多会出现包埋块不聚合,应重新配甲液. 参考文献 1陈文杰,陈辉树编着.造血系统疾病临床病理学,北京:北京医科 大学,中国协和医科大学联合出版社,1997年6月第1版. 2宋艳秋,高武等.应用塑料包埋风髓病理切片免疫组化