枯草芽胞杆菌紫外线诱变实验方案的优化.PDFVIP

微生物学通报 Mar. 20, 2016, 43(3): 695−700 Microbiology China /wswxtbcn tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150447 生物实验室 枯草芽胞杆菌紫外线诱变实验方案的优化 * 韦善君 张雪萌 李婧贤 戴景峰 冉坤念 刘立亚 周宜君 (中央民族大学生命与环境科学学院 北京 100081) 摘 要：【目的】优化枯草芽胞杆菌紫外线诱变实验教学方案，以便学生在实验中获得预期结果。 【方法】从菌体培养、活菌浓度估测和辐射参数三方面探讨影响实验结果的因素。【结果】采用 液体培养法活化菌体有利于制备均匀的菌悬液，采用比浊法估测初始菌悬液浓度可以指导学生将 2 3 其稀释至10 −10 CFU/mL 的浓度；涂布接种后平板表面干燥、培养皿盖内无明显水珠附着，是 获得单菌落的关键；在紫外辐射过程中采用固定的菌悬液体积和搅拌速度，可以获得规律性的辐 射剂量——致死效应曲线。【结论】优化后的方案实验结果易得、重复性好，可供教学和研究实 验参考。 关键词：细菌，枯草芽胞杆菌，紫外线诱变，实验教学 Optimized protocol for ultraviolet mutagenesis of Bacillus subtilis WEI Shan-Jun ZHANG Xue-Meng LI Jing-Xian DAI Jing-Feng RAN Kun-Nian * LIU Li-Ya ZHOU Yi-Jun (College of Life and Environmental Sciences, Minzu University of China, Beijing 100081, China) Abstract: [Objective] To optimize the experiment protocol of ultraviolet (UV) radiation of Bacillus subtilis so that students can get better results in the experiment lesson. [Methods] We optimized the protocol by determining the best bacterial cultivation, estimation of viable cells, and UV-radiation parameters. [Results] Liquid medium was better than agar slant to obtain a homogeneous suspension of cells. The cell amount of the initial bacterial suspension was