pGSK-3β和NF-κB在慢性支气管哮喘小鼠气道重塑中的表达水平及意义.pdf

中国医药生物技术 2010年 8月第5卷第4期 ChinMedBiotechnol，August2010，Vo1．5，No．4 281 · 论 著 · DOI：10．3969／crnba．j．issn．1673—713X．2010．04．009 pGSK一3p和NF．KB在慢性支气管哮喘 小鼠气道重塑中的表达水平及意义 蒋光 ，杨远 【摘要】 疾病生理病理过程中起重要作用，近年研究发现 目的 探讨磷酸化糖 原合成酶激酶 3p (phosphor-Ser9 GSK．3B具有逆 向调节心肌肥厚4【J、气道平滑肌肥 glycogensynthasekinase313，pGSK-313) 和核因子 kappaB 大增生5『的作用，Bentley等6【]发现急性支气管哮喘 (nuclearfactorkappaB，NF—rB)的表达水平在慢性支气管 模型的气道平滑肌细胞肥大、增生，上皮细胞和炎 哮喘气道重塑中的作用。 症细胞中失活的磷酸化 GSK．3p(pGSK一3p)含量 方法 16只雄性 BALB／c小鼠随机分为 2组：支气管哮 增加 。全肺 pGSK一3p增加，GSK．3p活性降低 ， 喘组与对照组，每组 8只，通过卵蛋白致敏和雾化激发制 说明 GSK．3B磷酸化、失活促进气道平滑肌重塑。 备小鼠慢性支气管哮喘模型，对照组全部以生理盐水代替； 有关 GSK一3B在慢性哮喘气道重塑过程 中的表达 2组小鼠分别在末次激发后 24h 内颈椎脱臼处死，取左肺 及作用尚不清楚。本实验 旨在利用卵蛋白致敏和激 通过 HE染色，光学显微镜观察气道重塑情况；取右肺采 发的慢性支气管哮喘小鼠模型，探讨支气管哮喘气 用蛋 白质 印迹方法测定肺组织 pGSK 3p、NF—rB、MMP一9 道重塑形成过程中 GSK．3B、NF．KB和 MMP一9的 的表达量 。 表达情况及相互关系，为气道重塑的发生机制提供 新的理论依据 。 结果 (1)支气管哮喘组出现管壁增厚，平滑肌增生、黏液分。 泌增加等气道重塑的特征性改变；(2)对照组 pGSK一3B、 NF一 、MMP一9的表达水平均小于支气管哮喘组 (P 1 材料与方法 1．1 主要试剂和仪器 0．05)，三者在慢性支气管哮喘小鼠中表达量增加。 清洁级雄性 BALB／c小 鼠 16只，6周龄，体 结论 卵蛋白致敏反复雾化激发可导致气道重塑，GSK一3B／ 重 16～20g，许可证号：SCXK (苏)2007．0001， NF．r．B 信号转导途径在支气管哮喘气道重塑 中起重要作 购于扬州大学 比较医学中心；V 级鸡卵清蛋 白 用 。 (ovalbumin，OVA )购 白美国 Sigma公司；兔抗 【关键词】 哮喘； 疾病模型，动物； 糖原合成酶激 磷酸化糖原合成酶激酶一3B(Ser9)多克隆抗体购 自 酶类： NF—rd3 美国 Cellsignal公司；鼠抗 NF—rd3p65单克隆抗 WWW．cmbp．net．on 中国医药生物技术 2010,5(4)．．281．284 体购 自美国 SantaCruz公司；兔抗 MMP一9多克 隆