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市售五香牛肉货架期预测模型建立 　　摘 要：以菌落总数为指标建立微生物生长模型及散装五香牛肉货架期预测模型。将市售散装五香牛肉分割贮藏，测定了4、7、10℃条件下，贮藏期内样品菌落总数的变化。对恒定温度下的五香牛肉建立微生物初级生长模型、平方根二级模型及货架期预测模型。建立菌落总数的一级模型（Gompertz方程），拟合度在95%以上；平方根二级模型的R2值为0.998，温度与生长速率的平方根呈良好的线性关系，并且残差值在0上下浮动。 关键词：菌落总数；五香牛肉；货架期预测；模型建立；食品安全 中图分类号：TS251.61 文献标志码：A 文章编号：1001-8123（2013）06-0025-04 五香牛肉作为一种传统的熟肉制品，一直深受大众的喜爱。然而由于其营养丰富，也极适合微生物的生长，在一定贮藏条件下，产品中残余微生物会迅速生长繁殖，从而最终导致产品腐败[1]。影响微生物生长的环境因素里，温度是第一重要的。在生产、储藏、运输和销售的过程中，温度的控制可以直接影响到肉品的质量。如果冷链系统不完善导致温度升高，微生物会迅速增殖，加速肉品的腐败变质，甚至会对公共健康构成潜在的威胁[2]。因此必须要掌握在不同温度下特定腐败菌的生长情况，才能更有效的对产品质量进行监测。 传统方法是通过对产品进行抽样检测，耗费大量时间和人力，却无法达到预见效果，而预测微生物学可以帮助解决此问题[3]。为了准确预测五香牛肉的货架期，研究了4、7、10℃条件下样品中的菌落总数变化。通过试验数据与模型数据的比对，分别采用Gompertz一级模型和平方根二级模型[4]，通过统计分析，利用MATLAB7.0软件进行回归拟合，最后建立货架期预测模型。期望为2013-04-15酱卤肉制品在市场上的正常流通、揭示酱卤肉制品的腐败机理、保证产品质量、延长产品货架期等实际问题的解决提供基础理论数据。 1 材料与方法 1.1 材料与试剂 市售散装五香牛肉，购于新百连锁超市宁阳店。 平板计数琼脂（plate count agar，PCA）培养基：用于测定菌落总数。PCA培养基成分见表1。 将表1各成分加于蒸馏水中，加热溶解，调pH值至7.0～7.2，分装，121℃灭菌15min，冷却至室温备用。 1.2 仪器与设备 LRH-150B生化培养箱 广东省医疗器械厂；LDZM-80KCS立式压力蒸汽灭菌锅 上海申安医疗器械厂；HDL-APPARATUS超净工作台 北京东联哈尔仪器制造有限公司。 1.3 方法 1.3.1 预处理 购买超市散装五香牛肉，用保鲜膜包裹，迅速转移到实验室中。在无菌条件下进行分割，垂直于肌纤维方向切成约50mm×50mm×20mm大小的肉块，每块肉质量约50.0g，分成8×3组，每组3块，将分组后的肉块装入托盘后以保鲜袋包装（模拟家庭存放状态），分别在4、7℃和10℃条件下储存0、2、4、6、8、10、12、14d。 1.3.2 微生物计数方法 微生物37℃培养48h，计数方法参照GB/T 4789.2―2010《食品安全国家标准：食品微生物学检验：菌落总数测定》[5]。 1.3.3 建模方法 采用Matlab7.0调用Fminsearch程序进行数据拟合与回归[6-7]。 2 结果与分析 2.1 贮藏温度对五香牛肉中菌落总数的影响 由图1可知，在4℃贮藏条件下，菌落总数变化较为缓慢，在整个贮藏期内7、10℃的贮藏环境下五香牛肉中的菌落总数明显高于4℃条件下的，说明低温对于肉制品中微生物的生长有明显的抑制效果，温度对产品菌落总数的影响显著。根据GB2726―2005《熟肉制品卫生标准》，对酱卤类肉品微生物的安全标准为8×104CFU/g（对数值为4.903）[8]，而经过实验，只有在4℃以下，且保持恒温的条件下，才能保证五香牛肉在2周的贮藏时间内微生物标准合格。因此，建议产品在4℃及4℃以下温度贮藏，且温度应尽量保持恒定[9-10]。 2.2 模型的拟合与修正 2.2.1 一级模型的修正与拟合 初级模型主要表达微生物量随着时间变化的函数关系，在此基础上可进一步计算出延迟期、生长速率和最大菌落数[11]。对Gompertz模型修正后，使模型中的参数都有一定的生物学意义，修正后的Gompertz模型不仅可以更好的描述本实验微生物的生长情况，而且，修正后的Gompertz模型无论从简单性还是从有效性来说都是最好的[12-13]。 对经典Gompertz模型稍作变化，可以得到如下修正的Gompertz模型： 式中：N：微生物在时间t时总量；N0：t=-∞时生物量（近似相当于t=0时的初始菌数）；A：t=+∞