针刺干预实验性脑出血大鼠细胞凋亡的时效研究.pdfVIP

— — 286—— 中国中医急症 2014年2月第 23卷第 2期 JETCM．Feb．2014，Vo1．23，No．2 · 粤胡盒报 告 · 针刺干预实验性脑出血大鼠细胞凋亡的时效 研究 刘学文 周 竞 彭 平 张宏生 李 平 荆志伟 (1．首都医科大学潞河教学医院，北京 101100；2．北方工业大学医院，北京 100041；3．中国中 医科学院望京医院，北京 100102；4．北京中医药大学，北京 100029；5．天津市第三中心医院， 天津 300170；6．中国中医科学院，北京 100700) 中图分类号：R246 文献标志码 ：A 文章编号：1004—745X(2014)02—0286-04 doi：10．39690．issn．1004—745X．2014．02．404 摘【要】目的 观察针刺对脑血肿周围组织细胞凋亡等的影响，研究不同时机介入针刺对脑出血病理状态下 的脑保护作用。方法 采用 自体血注入尾状核模型大 鼠，随机分为空 白组、模型组和四个针刺组。针刺组分别 于造模成功后 3h、9h、24h、48h开始针刺 ，每 日针刺 2次，连续针刺 3d，各针刺组与模型组均在造模成功后 5d处死．断头取脑，观察相关指标。结果 针刺能降低脑出血大 鼠脑组织促凋亡因子Bax的表达，增高抑凋亡 因子 Bc1—2及 HSP70的表达 ，减少细胞凋亡的发生 ，这些作用均与介入时机正性相关 。结论 针刺能减轻脑 出血大 鼠脑组织细胞凋亡．并且介入时机越早 ，效果越好 。 【关键词】脑出血 细胞凋亡 Bcl一2／Bax 热休克蛋白 治疗时机 脑出血是指原发性非外伤性脑实质 内出血 ，是急 镜 (日本)；天平 (常熟市衡器厂HR一120)；手术器械 。 性脑血管疾病中的危重类型，发病率、死亡率及致残率 磷酸盐缓冲试剂 (0．1mol／LPBS液 ，pH7．2～7．4)： 均较高 ，严重危害人类健康及生活质量 [1]，目前神经 用氯化钠 9g，12水磷酸氢二钠6g，水磷酸二氢钠0．4g， 内、外科治疗效果并不令人满意l2]，脑 出血早期是治疗 加蒸馏水至 1000mL，调整pH到7．2～7．4。枸橼酸盐缓 的关键 。中医药包括针灸疗法在脑出血急性期治疗 冲液 (0．O1mol／L)：枸橼酸三钠 3g，枸橼酸 0．4g，加蒸 中得到广泛应用，已成为整个治疗体系中重要的一部 馏水至 1000mL。防脱片剂 ：APES购 自北京 中山生物 分 ]。但在脑出血发病后不同时期给予针刺疗效是否 技术有限公司。甲苯、丙酮 、无水 乙醇、30％过氧 乙酸 ， 相同，针刺介入时机是否越早越好 ，是需要解决的问 均为上海试剂一厂产品。苏木素、伊红为北京试剂三厂 题 。本研究通过观察不同时机介入针刺对细胞凋亡 因 产 品。即用型 SABC免疫组织化学染色试剂盒 、DAB 子 Bcl一2／Bax及 HSP70的表达 的影响，研究针刺治疗 显色试剂盒 、一抗均为武汉博士德生物工程有 限公司 脑出血时机和疗效关系及其机理 ，以期为临床提供可 产 品。TUNEL盒购于博海生物技术有限公司。 靠的理论依据。 1．3 模型制备 以 10％水合氯醛 (300mg／kg体质量) 腹腔麻醉后俯卧位固定于立体定向仪上 。固定大 鼠时， 1 材料与方法 先 固定耳间线 ，待听到水平针穿破耳鼓膜的破裂声后 ， 1．1 动物与分组 健康 Wistar大鼠(北京医科大学实 移头部至正中，接着 固定 门齿于门齿钩上，调整立体定 验动物中心提供)，体质量 250～320g，雄性。随机分为 向仪，使门齿钩平面比耳间线平面低 2．4mm，此时前 空 白组 、模型组及按针刺介入时间分为的3h针刺组 、