专题71 微生物的培养和应用-高考全攻略之备战2018年高考生物考点一遍过.docVIP

1．培养基 （1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 （2）营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。 （3）种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。 2．无菌技术 （1）含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 （2）关键：防止外来杂菌的入侵。 （3）不同对象的无菌操作方法(连线) 3．大肠杆菌的纯化培养 （1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 ①操作步骤 →→→→ ②倒平板的方法及注意事项 a．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。 b．甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。 c．丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。 （2）纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。 ②纯化大肠杆菌的关键步骤是接种。 ③常用的微生物接种方法有两种 a．平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 b．稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 系列稀释操作(如图所示)： 涂布平板操作(如图所示)： （3）菌种的保存方法 ①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。 ②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。 4．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 （1）分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。 （2）统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。 （3）实验流程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察→细菌的计数。 5．分解纤维素的微生物的分离 （1）纤维素酶 ①组成：纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。 ②作用 纤维素纤维二糖葡萄糖 （2）纤维素分解菌的筛选 ①原理 ②筛选方法：刚果红染色法，即通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 ③培养基：以纤维素为唯一碳源的选择培养基。 ④实验流程 考向一 培养基及其制备方法分析 1．下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是 成分 蛋白胨 葡萄糖 K2HPO4 伊红 美蓝 蒸馏水 含量 10 g 10 g 2 g 0.4 g 0.065 g 1 000 mL A．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基 B．该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨 C．该培养基缺少提供生长因子的物质 D．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用 【参考答案】B 错误。 2．高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选出了能高效生产高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。 （1）Ⅰ号培养基从物理状态来看，属于固体培养基，配制时要加入________作为凝固剂，从用途来看属于选择培养基，应以________作为唯一碳源。 （2）配置固体培养基的基本步骤是__________。 A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板 （3）溶化时，烧杯中加入琼脂后要不停地________，防止琼脂糊底引起烧杯破裂。对培养基灭菌的方法一般为____________________。 （4）①过程是__________，②过程所使用的接种方法是________________法。 （5）部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放________分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈，挑选相应的菌落，接种到Ⅱ号培养基进一步分离纯化后，再对菌种进行_______培养。 【答案】（1）琼脂　 淀粉　 （2）C （3）搅拌　 高压蒸气灭菌 （4）稀释　 涂布分离　 （5）淀粉酶　 扩大 菌落再分离纯化可获得相应菌种，以后可以扩大培养用于生产。 考向二 无菌技术的操作 3．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作。现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染。请分析下列操作中错误的是 ①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 ②接种操作要在酒精灯火焰附近进行 ③无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒 ④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌 ⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌 A．①③ B．②④ C．③⑤ D．④⑥ 【参考答案】D 4．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方