紫外-可见光分光光度法2.ppt

2.3 吸光光度法的灵敏度与准确度 2.3.1 灵敏度的表示方法 2. Sandell(桑德尔)灵敏度 (S) 定义：截面积为1cm2的液层在一定波长或波段处，测得吸光度为0.001时所含物质的量。 用S表示，单位：?g·cm-2 A= ? bc=0.001 bc ＝0.001/ ? 例1 邻二氮菲光度法测铁?(Fe)=1.0mg/L,  b=2cm , A=0.38 计算? 、S 和 解： c(Fe)=1.0 mg/L=1.0×10-3/55.85 =1.8×10-5(mol·L-1) c =1.0mg/L=1.0×10-3 g /1000mL = 1.0×10-4 g/100mL 例2 比较用以下两种方法测Fe的灵敏度. B. 用4,7-二苯基邻二氮菲光度法测定铁 ε533＝2.2×104 L·mol-1·cm-1 S = 55.85/(2.2×104)＝0.0025 (?g·cm-2) 2.3.2 准确度—仪器测量误差 由于T 与浓度c 不是线性关系，故不同浓度时的仪器读数误差?T 引起的测量误差? c/c不同。 测量误差公式推导: dA = d(-lgT) = d(-0.434lnT) = - 0.434dT/T 2.4.1 显色剂与显色反应  显色反应：在光度分析中将试样中的待测组分转变成有色化合物的反应叫显色反应。 显色反应一般分为两大类：一类是配位反应；另一类是氧化还原反应。 Fe3＋＋SCN－=FeSCN－； Mn2＋－5e＋4H2O= MnO4－＋8H＋ 在这两类反应中，用得较多的是配位反应。 显色剂：与待测组分生成有色化合物的试剂叫显色剂； 1．无机显色剂： 2．有机显色剂： 1）优点： a．具有鲜明的颜色，ε都很大（一般可达到104以上），所以测定的灵敏度很高； b．生成的一般为螯合物，稳定性很好，一般离解常数都很小； c．选择性好 d．有些有色配合物易溶于有机溶剂，可进行萃取光度分析，提高了测定的灵敏度和选择性。 有机显色剂 显色反应的选择 灵敏度高，一般ε10 4; 选择性好; 显色剂在测定波长处无明显吸收, 对照性好, ? ?max 60 nm; 反应生成的有色化合物组成恒定，稳定; 显色条件易于控制，重现性好. 2.4.2 显色条件的确定 2. 显色反应酸度（c(M)、 c(R)一定） 2.4.3 测定中的干扰以及消除方法 2. 物理法—选择适当的测定波长 --选择适当的参比溶液 1. 仅络合物有吸收，溶剂作参比。 如 phen—Fe2+ 标准曲线 2.待测液也有吸收，被测液作参比。 如 测汽水中的 Fe 3. 显色剂或其他试剂也有吸收，空白溶液作参比 例:邻二氮菲光度法测Li2CO3中的 Fe， 参比溶液为不含Li2CO3样品的所有试剂。 4. 干扰组分与显色剂有反应,又无法掩蔽消除时： 1）掩蔽被测组分，再加入显色剂，作参比. 2）加入等量干扰组分到空白溶液中,作参比. 2.4.4 光度测量误差及测量条件的选择 光度分析的误差来源于两方面：一方面是各种化学因素引入的误差；另一方面是仪器测量不准引入的误差。对于化学因素，前面巳经讲过，现在我们来看仪器测量不准引入的误差。 1.仪器测量误差： 任何光度计都有一定的测量误差，测量误差的来源主要是光源的发光强度不稳定，光电效应的非线性，电位计的非线性，杂散光的影响，单色器的光不纯等等因素. 具体说来，对于一个给定的光度计来说，其透光率的读数误差等于常数△T，约为0.01～0.02。 T%在80～10%即A=1～0.1时的浓度测量的相对误差较小。 对于精度较好的仪器，当T%在60～20%（A=0.2～0.7）时，测量误差约为1%。 当T=0.368或A=0.434时，浓度的测量误差最小。 2．测量波长的选择： 一般选用待测物质的最大吸收波长作为测量波长（入射光） 但当在最大吸收波长处有干扰时，则应根据“吸收最大干扰最小”的原则