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关于胆红素的若干问题.ppt

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关于胆红素的若干问题

关于胆红素的若干问题 宋克征(总工程师) 宁波美康生物科技有限公司 三、胆红素在血液中的运转 四、与胆红素竞争白蛋白的因素 pH环境和钙离子 某些阴离子药物: 磺胺类抗菌素、巴比妥和水杨酸盐 游离脂肪酸等 白蛋白的分子浓度 五、胆红素在肝细胞内的代谢 六、结合胆红素的结构 七、胆红素在肠道的运转 (二)黄疸 黄疸的分类 (1)?溶血性黄疸,肝前性黄疸 (2) 肝细胞黄疸,肝性黄疸 (3) 阻塞性黄疸,肝后性黄疸 (4)体质性黄疸,慢性先天性黄疸 (三)δ胆红素 一、δ胆红素的结构和性能 二、δ胆红素存在的意义 一、δ胆红素的结构和性能 二、δ胆红素存在的意义 胆红素多了一个成分。 TBIL=Bu+mBc+dBc+Bδ δ胆红素的发现让人们认识到临床好转但黄疸不退的真实原因。 δ胆红素的出现让人们懂得了用测Bc代替直接胆红素的测定,这样可以更加直接地了解真实病情。 计算Bδ/TBIL有助于判断恢复期肝病的预后。 δ胆红素在正常人以及高Bu病人(新生儿黄疸)中缺乏。 δ胆红素仅在那些脂型高胆红素血症的病人血清中被检测到。 (四)新生儿胆红素 一、新生儿的生理性黄疸 50-60%足月产的婴儿和大于80%的早产儿于出生后2-3天出现黄疸,4-5天出现高峰。一般足月儿两周内消退,早产儿3-4周消退。 生理性黄疸的上限:足月儿205.2μmol/L 早产儿257μmol/L 二、病理性黄疸的特点 1.生后24小时内出现 2.重症黄疸205-265μmol/L 3.持续时间长 4.可以退而再现 三、核黄疸的风险 下面列出的数据供我们检验新生儿胆红素的时候作为警戒性的参考 足月新生儿 胆红素308-362 μmol/L 早产病弱儿 胆红素137-205 μmol/L 有可能出现新生儿的核黄疸。 提示尽快进入蓝光治疗。光疗十分有效,胆红素会迅速下降。用420-470nm波长,每日可下降51.3-85.5 μmol/L。 光疗的机理 在蓝光照射下,体内的胆红素很快会从ZZ构型转化为EE构型,使胆红素的极性增加,能溶于水,从而有害的毒性胆红素(Bu)会大量从尿和胆汁中排出体外。 (五)胆红素的检测 一、SFDA对胆红素测定的新要求 标准化:企业标准、行业标准、国家标准,逐级升高。 量值溯源:通过一条比较链,使检测的结果或标准值与国家标准联系起来。 检测系统:完成一个项目所涉及的仪器、试剂、校准品、质控品、操作程序等的组合,量值溯源要求采用整个检测系统。 基体效应 基体效应 分析样品中,除分析物以外的所有其他物质和组分,称为该分析物的基体,亦称“介质”或“基质”。 检测系统检测样品中的分析物时,处于分析物周围的所有非分析物对分析物参与反应的影响,称基体效应。对定标和质控的基体效应应予以特别关注。 对基体效应大小的估计强调采用回收实验。 二、测准胆红素的基本方法 方法不复杂,测准很困难! 胆红素的特性——不稳定 存在三怕:怕热、怕光、怕氧化 罗氏公司对胆红素不稳定的估计 cfas校正液使用说明书对胆红素可用的稳定时间的规定 正常值质控 异常值质控 3.基本方法的设计 必须充分考虑、周到地照顾到以上关于稳定时限的规定。 安排好定标和质控的两个环节,是能否测准的根本关键。 在实际的操作中,思想上要有“动”的观念,去观察分析结果而作相应的修正,如果观察不仔细,很容易脱靶,使结果超出允许范围。 三、化学氧化法测胆红素的实践 按检测系统规定做好准备,实施举例如下: 仪器:Hitachi7060 试剂:美康化学氧化法测总直胆红素双试剂 校准品:以罗氏cfas为模板,美康公司自产T/D两项混合校正液(冻干品) 质控品:以罗氏高低二水平质控为模板,美康公司自产T/D两项混合质控液(冻干品) 操作参数 5.操作参数 方法:两点终点法;反应总时间,10分钟;光径,1.0cm;波长,546nm/450nm(主);样品:R1:R2为8:240:60(μL) 步骤:样品+R1孵育5分钟,测空白吸光度A1, 加入R2反应5分钟,测最后吸光度A2。 计算: 6.注意 贯彻“动”的观念,具体操作严格做到定标与质控使用中严格遵守规定的时限要求,还要做到同步操作。 以上规定,可随不同牌号的仪器,做适当的修改,但不能改动比例。 结果评判:试剂空白吸光度0.01

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