子宫腺肌症内膜细胞中孕激素受体与凋亡因子Bcl2、Bax的表达及意义.docVIP

精品论文 参考文献 子宫腺肌症内膜细胞中孕激素受体与凋亡因子Bcl2、Bax的表达及意义 周立蓉 　　乐山职业技术学院 四川乐山614000 　　【摘要】 　　目的：通过检测孕激素受体（PR）、凋亡抑制基因Bcl2、Bax蛋白在子宫腺肌症（Adenomyosis）中的表达，探讨PR与Bcl2、Bax的关系及其与发病的相关性以选择更有效的药物治疗方案。方法：采用免疫组织化学方法及图像分析技术检测PR、Bcl2、Bax在患者异位及在位内膜细胞中的表达情况。结果：两种检测方法检测结果一致，异位内膜PR、Bcl2表达低于在位内膜（Plt;005）,异位内膜Bax表达高于在位内膜（Plt;005），在位内膜与异位内膜PR、Bcl2、Bax增殖期与分泌期表达差异无统计学意义（Plt;005）。结论：在位及异位内膜中Bcl2和Bax的表达均与子宫内膜周期性改变无关，不受卵巢激素调节，腺肌症细胞凋亡持续性减弱，增殖性能持续性增强。 　　【关键词】子宫腺肌症；孕激素受体；细胞凋亡；免疫组织化学 　　【中图分类号】R71132 　　【文献标识码】B【文章编号】16748999(2013)12020002 　　子宫腺肌症（adenomyosis,AM）多发生于3050岁经产妇，约半数患者合并子宫肌瘤，约15%患者合并子宫内膜异位症。其发生可能与高雌激素的刺激有关。孕激素具有雌激素拮抗作用，孕激素类药物是治疗子宫内膜异位症的经典药物。多数学者认为AM患者子宫内膜细胞凋亡减弱、增殖增强与发病有关。本研究通过免疫组织化学方法检测AM在位及异位内膜上PR与凋亡抑制基因Bcl2、促凋亡基因Bax的表达情况，探讨PR及相关凋亡蛋白在AM细胞凋亡与增殖活动中的调控作用。 　　1材料与方法 　　11材料: 　　 收集我院2005年1月~2010年12月间经手术切除并经病理证实的AM患者80例，年龄36~52岁，术中取在位及异位子宫内膜，术后均经病理证实为AM，其中增殖期40例，分泌期40例。对照组40例（正常内膜组）；年龄27~44岁，为生育年龄妇女正常子宫内膜，其中增殖期20例，分泌期20例。符合以下标准：①月经周期规则，经量中等；②无宫内节育器、不明原因的不孕症及能分泌激素的卵巢肿瘤等；③诊刮无明显子宫内膜病变；④至少6个月内未服用甾体类激素（包括避孕及流产药物）。两组年龄差异无统计学意义（Pgt;005）。 　　12方法: 　　 标本离体后经10%甲醛固定，石蜡包埋，每份切片连续切片4um*5张，1张为HE染色作月经周期分期及进一步确诊，其余作免疫组化EnVision法染色，按说明书操作。一抗工作液均以1:50浓度。阴性对照以PBS抗体稀释液代替一抗。阳性对照采用已知的乳腺癌组织切片。以上试剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 　　13结果判定: 　　免疫组化采用双盲法观察，其判定按VOLM等的判断标准：①选择染色均匀对比好的区域，在400倍视野下计数着色细胞占视野细胞总数的百分数，共计5个视野，取平均值，以着色细胞占视野细胞总数的多少分0~3级：0级：0；1级：lt;25%；2级：26%~50%；3级：gt;50%。②按着色细胞强弱分0~3级：0级：阴性；1级：弱；2级：中；3级：强。③将①、②两组级别的数值之和作为最终判断结果。0为（）；1~2为（+）；3~4为（++）；5~6为（+++）。 采用数码医学图像分析系统分别定量测定各组子宫内膜组织中相对应期别内膜细胞PR、Bcl2、Bax的表达情况：以切片中细胞着棕黄、棕褐色为阳性细胞，每张切片在高倍（*400）光镜下随机选取5个视野，测出每个视野阳性细胞的平均光密度（OD）值，即为PR、Bcl2、Bax的表达量。光密度值与PR、Bcl2、Bax表达量成正比。 　　14统计学处理: 　　计数资料采用多样本KruskalWallis及两样本Wilcoxon秩和检验，计量资料结果以均数plusmn;标准差（chi;plusmn;S）表示，用SPSS115软件包进行统计处理，采用t检验，Plt;005为差异有统计学意义。相关性分析采用Person等级相关分析法。 　　2结果 　　21PR在各组中的表达情况: AM组异位内膜PR表达低于正常内膜（Plt;005）及在内膜（Plt;005）。正常内膜PR增殖表达高于分泌期（Plt;005），在位内膜与异位内膜PR增殖期与分泌期表达差异无统计学意义（Plt;005）。 　　22Bcl2在各组中的表达情况: 正常内膜Bcl2表达低于异位内膜（Plt;001）及在位内膜（Plt;001）。异位内膜Bcl2表达低于在位内膜（Plt;001），正常内膜中增殖期表达均高于分泌期（Plt;0