HLPC法测定妇炎康咀嚼片中芍药苷的含量.docVIP

精品论文 参考文献 HLPC法测定妇炎康咀嚼片中芍药苷的含量 郭俊波 刘世娟 冯淑娟（黑龙江仁合堂药业有限责任公司 黑龙江牡丹江 157011） 【中图分类号】R917 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)02-0073-02 【摘要】 目的 建立反相高效液相色谱法测定妇炎康咀嚼片中芍药苷含量的方法。方法 采用BOS Hypersil C18 ODS2色谱柱，乙腈—0.4%醋酸为流动相，按外标法进行检测。结果 芍药苷在浓度为2.50ug/ml～75.06ug/ml范围内线性关系良好，r=0.9977,样品加样平均回收率为99.16%，RSD为1.42%。结论 该方法简便、准确、重复性好、专属性强，可作为妇炎康咀嚼片的含量测定有效方法。 【关键词】 妇炎康咀嚼片 高效液相色谱法 芍药苷 含量测定 妇炎康咀嚼片是纯中药制剂，经过现代中药提取技术，科学配制而成。我们参照《中国药典》2005年版一部“赤芍”药材含量测定方法，选用高效液相色谱法测定妇炎康咀嚼片中的芍药苷的含量。结果表明此方法可行，并且专属性较好。经方法学研究，现报道如下。 1 仪器与试药 Agilent 1200高效液相色谱仪；GB15-DAD二极管阵列检测器；G1314A -VWD可变波长检测器；Agilent化学工作站；Hypersil C18 ODS2色谱柱；UV-1201型紫外可见分光光度计；BP-211D电子天平；SB3200T超声波清洗器。 乙腈为色谱纯；水为超纯水；其余试剂均为分析纯。对照品：芍药苷；妇炎康咀嚼片样品。 2 色谱条件 色谱柱：Hypersil C18 ODS2色谱柱（250mmtimes;4.6mm 5um）；流动相：乙腈—0.4%醋酸（12：88）；检测波长为230nm；流速：1.0ml.min-1，柱温为室温；进样量20ul；面积外标法定量。理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000。 3 方法与结果 3.1测定溶液的制备 3.1.1样品溶液的制备 取本品适量研细，取4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理40分钟放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液25ml蒸干，残渣加50%甲醇使溶解，通过已处理好的中性氧化铝柱以50%甲醇洗脱。收集洗脱液置50ml量瓶中至刻度，摇匀，用0.45mu;m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 3.1.2阴性对照溶液的制备 按质量标准中处方比例同法制备不含赤芍的阴性样品溶液。 3.1.3对照品溶液的制备 取经80℃干燥至恒重的芍药苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含25mu;g的溶液，摇匀即得。 3.2检测波长的选择及空白试验 取上述芍药苷对照品溶液，照紫外-可见分光光度法，在200nm～400nm的范围内扫描，结果芍药苷对照品溶液在230nm处有最大的吸收，因而，确定本品含量测定的检测波长为230nm。 取对照品溶液、阴性对照品溶液和供试品溶液，在上述色谱条件下测定HLPC图谱。芍药苷的分离度较好，阴性样品在相应出峰时间区域没有干扰峰出现，故对样品的测定无干扰作用。 3.3线性关系的考察 按照《中华人民共和国药典》2005年版附录Ⅵ D高效液相色谱法试验，分别精密吸取20mu;l溶液注入色谱仪，记录峰面积，结果表明：芍药苷在浓度为2.50ug/ml～75.06ug/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系。 3.4精密度试验 精密吸取浓度为24.98ug/ml的对照品溶液，连续进样5次，每次进样20ul，记录峰面积，结果表明，精密度良好。 3.5重复性试验 精密制得供试品溶液,另精密称取芍药苷对照品适量制得对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20mu;l，注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算含量，RSD值为1.78%，说明本品重复性良好。 3.6稳定性实验 取同一批号样品溶液，在室温放置，按含量测定的方法操作，进行日内变异测定， 结果表明，本品含量测定项下的供试品溶液，RSD（%）：1.07，在12小时内稳定性良好，能满足测定要求。 3.7回收率试验 取已知含量的样品约2g，共6份，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，再分别加入对照品溶液（0.2