HPLC法测定吉祥草中β-胡萝卜素.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC法测定吉祥草中β-胡萝卜素 陈玲 鲍家科 徐洪 熊慧林 陈万里（贵州省药品检验所贵州贵阳550004) 作者简介：陈玲（1959.5-），女，副主任药师。科学及研究方向：药物分析。 【摘要】目的:建立吉祥草中beta;-胡萝卜素的高效液相色谱测定方法。方法：以丙酮-石油醚（1∶1v/v）的混合溶液浸提吉祥草中beta;-胡萝卜素。色谱条件：色谱柱为DiamonsilC18柱（200mmtimes;4.6mm，5mu;m），流动相：乙腈-甲醇-乙酸乙酯-三乙胺（80∶10∶10∶0.05）；流速：1.0mlmiddot;min-1；柱温20℃；检测波长为450nm。进行了线性关系、精密度、稳定性、重复性、回收率等项的考察。结果：beta;-胡萝卜素的质量浓度在0.0074～0.0666mu;g范围内线性关系良好（r=0.9999），平均回收率（n=6）为99.33%，稳定性400分钟内RSD=1.94%。结论：该法专属性强，结果准确，重现性好，可用作吉祥草中beta;-胡萝卜素的含量测定方法。 【关键词】吉祥草;beta;-胡萝卜素;高效液相色谱法 【中图分类号】TS207【文献标识码】A【文章编号】1008-6455（2010）07-0279-02 吉祥草为百合科植物吉祥草Reineckia carnea（Andr.）Kunth.的干燥全草。具有滋阴润肺，凉血止血的功效。主要用于肺燥咳喘，阴虚咳嗽[1]。据报道吉祥草中含有较多的beta;-胡萝卜素[2],beta;-胡萝卜素是胡萝卜素的主要组成部分，而大量研究表明胡萝卜素是维生素A的重要来源,具有抗氧化、抗癌、抗辐射、增强免疫力等生理和药用价值[3-4]。目前有关吉祥草中beta;-胡萝卜素定量研究还未见报道。本研究采用高效液相色谱法，测定吉祥草中beta;-胡萝卜素，为全面控制吉祥草药材质量提供依据。 1仪器与试药 紫外可见分光光度仪：岛津UV-2550型分光光度仪；高效液相色谱仪：岛津LC-2010ATH液相色谱仪，LC-solution色谱工作站。色谱柱为Diamonsil C18(200mmtimes;4.60mm，5mu;m)；beta;-胡萝卜素对照品（100445-200701，含量30.9%）购自中国药品生物制品检定所；吉祥草药材产自贵州省各地，经贵州省药品检验所熊慧林主任药师鉴定为百合科植物吉祥草Reineckia carne（Andr.）Kunth；甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。 2方法与结果 2.1含量测定［4-8］ 2.1.1检测波长的选择经对beta;-胡萝卜素对照品溶液进行紫外扫描，发现在450nm处有最大吸收峰。因此选择450nm作为检测波长。 2.1.2对照品溶液的制备:精密称取beta;-胡萝卜素对照品适量，加丙酮制成每毫升约含4.0mu;g的溶液。 2.1.3供试品溶液的制备:取吉祥草粉末1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，用丙酮-石油醚（30～60℃）（1∶1v/v）的混合溶液重复浸提至溶液无色，浸提液置抽风橱内自然挥干，残渣用丙酮定溶至10ml，经0.45mu;m的微孔滤膜滤过，续滤液作为供试品溶液。 2.1.4色谱条件及含量测定:色谱柱为迪马C18(200mmtimes;4.60mm，5mu;m)，柱温20℃ ；流动相：乙腈-甲醇-乙酸乙酯-三乙胺（80∶10∶10∶0.05）；流速：1.0mlmiddot;min-1；检测波长为450nm。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10mu;l，注入高效液相色谱仪，进行含量测定。 2.1.5线性关系考察:精密吸取上述beta;-胡萝卜素对照品溶液2，6，10，14，18mu;l注入高效液相色谱仪，依法测定，以峰面积为纵坐标，beta;-胡萝卜素浓度为横坐标，绘制标准曲线，线性回归方程：Y00000x-3712.95000，R2=0.99995。结果表明，beta;-胡萝卜素在0.0074～0.0666mu;g范围内具有良好的线性关系,见图1。 . 2.1.6精密度考察:取同一对照品，分别重复进样6次，对照品溶液中beta;-胡萝卜素RSD=1.55%（n=6）。 2.1.7重复性实验:取吉祥草6份，精密称定，按“样品含量测定”项下的方法操作，制成供试品溶液，测定beta;-胡萝卜素的平均含量为37.96mg/g，RSD为1.68%。（样品为紫云县产）。 2.1.8稳定性实验:将