HPLC法测定注射用前列地尔杂质前列腺素A1的方法学研究.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC法测定注射用前列地尔杂质前列腺素A1的方法学研究 1杭州澳亚生物技术有限公司 杭州 310018；2白杨街道社区卫生服务中心 杭州 310018 摘要：目的 验证HPLC法测定注射用前列地尔杂质前列腺素A1的方法。方法 采用 C18（4.6mmtimes;250mm，5mu;m）色谱柱，以乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（pH4.9）（40：60）为流动相，检测波长为214nm。结果 方法的专属性及耐用性良好；在前列腺素A1进样量为14.55～232.80ng范围内与色谱峰面积线性关系良好；平均回收率在99.6%～101.5%之间，相对标准差RSD为0.65%。结论 本方法简便、快速、灵敏，可有效检测前列腺素A1。 关键词：前列地尔；前列腺素A1；HPLC 前列地尔是一种疗效确切的血管扩张药，是一种人体生理物质，有抑制血小板聚集、血栓素A2生成、动脉粥样脂质斑块形成及免疫复合物的作用，并能扩张外周和冠脉血管。本研究拟??高效液相色谱法测定注射用前列地尔的有关物质前列腺素A1方法学的专属性进行验证。 1 仪器与试药 仪器：Agilent 1200 高效液相色谱仪；色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱（250mmtimes;4.6mm，5mu;m）；前列地尔对照品：中国食品药品检定研究院 140659-201203；前列腺素A1对照品：中国食品药品检定研究院 140790-201001；注射用前列地尔：杭州澳亚生物技术有限公司 13103123 2 方法与结果 参照《中国药典》2010年版二部注射用前列地尔标准的前列腺素A1检查项色谱条件进行。 2.1色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（pH4.9）（40：60）为流动相；检测波长为214nm；进样量为50mu;l。 2.2 供试品溶液的制备 取本品适量，加25%乙醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含前列地尔0.1mg的溶液，作为供试品溶液。 2.3 对照溶液的制备 取前列腺素A1杂质对照品适量，精密称定，用25%乙醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含3mu;g的溶液，作为杂质对照品溶液。 2.4测定波长的选择 前列腺素A1和注射用前列地尔在波长范围为190nm～400nm进行紫外扫描，并在214nm处测定吸光度，显示在214nm处有吸收。 2.5 专属性试验 2.5.1 酸破坏试验：取注射用前列地尔样品1支，加入0.5ml浓度为0.5mol/L盐酸溶液，放置30分钟后，加入0.5ml浓度为0.5mol/L氢氧化钠溶液，混匀，中和，立即精密量取 50mu;l，注入液相色谱仪； 2.5.2 碱破坏试验：取注射用前列地尔样品1支，加入0.5ml浓度为0.01mol/L氢氧化钠溶液，放置5分钟后，加入0.5ml 浓度为0.01mol/L盐酸溶液，混匀，中和，立即精密量取 50mu;l，注入液相色谱仪； 2.5.3 氧化破坏样品：取注射用前列地尔样品1支，加入1ml浓度为35%H2O2溶液，放置10分钟，立即精密量取 50mu;l，注入液相色谱仪； 2.5.4 光照破坏样品：取注射用前列地尔样品1支，加25％乙醇溶液溶解，放置在（4500plusmn;500lx）的灯光下照射24 h，立即精密量取 50mu;l，注入液相色谱仪。 2.5.5 高温破坏样品：取注射用前列地尔样品5支，加25％乙醇溶液定容至5ml，放置水浴中加热4 h，立即精密量取 50mu;l，注入液相色谱仪。 另取适量辅料同法处理，记录色谱图 结果：本品溶液经酸、碱、氧化、光照、高温条件下产生的前列腺素A1杂质峰与主峰有效分离，而辅料对于有关物质（前列腺素A1）的检查无干扰。表明该法对于检测本品的有关物质（前列腺素A1）及其本品稳定性试验考察产生的降解产物（前列腺素A1）是可行的。 2.6 溶液稳定性试验 精密称取前列腺素A1 适量，加25%乙醇配制成浓度约为3mu;g/ml的溶液，参照前列腺素A1项下的方法，分别于0、2、4、6、8、10、12小时取样50mu;l注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果：前列腺素A1测定液在12h内的RSD%为0.37%，小于2.0%，本品在12小时内稳定。 2.7前列腺素A1定量限 取