HPLC 法测定粉防己提取物中汉防己甲素的含量.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC 法测定粉防己提取物中汉防己甲素的含量 钟彩娜1※ 唐新2 1.南宁市景昌中药饮片有限公司 广西南宁 530003；2.广西康华药业有限责任公司 广西南宁 530003 【摘 要】目的：建立高效液相色谱法测定粉防己提取物中汉防己甲素的含量。方法：采用Agilent ZORBAX SB-C18 色谱柱（5mu;m，4.6mmtimes;250mm），0.05%二乙醇胺甲醇-乙腈-水（3：1：1）为流动相，流速为1.0mlmiddot;min-1，检测波长为283nm。结果：汉防己甲素在63.04mu;g/ml～315.20mu;g/ml 范围内线性关系良好，r=0.9993，平均回收98.08%，RSD=0.87%。结论：该法简便、快速、专属性好，结果准确、可靠。 【关键词】粉防己提取物；汉防己甲素；高效液相色谱法 【中图分类号】R172.6+25.8【文献标识码】A【文章编号】1276-7808（2015）-07-337-01 粉防己为防己科千金藤属植物（Stephania plant）的干燥块根，其有效成分主要有汉防己甲素和汉防己乙素等生物碱类，具有利水消肿，祛风止痛。临床上用于治疗水肿脚气、小便不利、风湿痹痛、湿疹疮毒、高血压症[1]；资料显示，汉防己甲素具有消炎、镇痛、降血压、抗肝及肺纤维化等作用[2]。目前，粉防己提取物汉防己甲素的含量测定采用的是滴定法，但专属性差，不能排除杂质的干扰，本文改用高效液相色谱法进行测定，可提高专属性和结果的准确性。 1 仪器与试药 安捷伦1260 型高效液相色谱仪，美国安捷伦科技公司。AgilentZORBAX SB-C18 色谱柱，5mu;m，4.6 mmtimes;250mm。汉防己甲素对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号：110711-200708），乙腈、甲醇为色谱纯，水为超纯水，其它试剂均为分析纯。 2 实验方法与结果 2.1 色谱条件 以十八烷基硅烷化键和硅胶为填料；以0.05%二乙醇胺甲醇-乙腈-水（3：1：1）为流动相；检测波长283nm；流速为1.0ml/min；柱温为室温。 2.2 测定方法 精密称取汉防己甲素对照品适量，用甲醇溶解并稀释成约含汉防己甲素315.2mu;g/ml 的溶液，作为对照品溶液；另取粉防己提取物，捻碎混匀，精密称取适量，加入适量甲醇摇匀，超声处理30min，取出，再加定容至0.5mg/ml，滤过，续滤液作为供试品溶液。取两种溶液各10mu;l，用外标法以主峰面积定量。 2.3 色谱效果 以0.1mol/L 盐酸溶液为溶剂，制备对照品溶液、样品溶液及不含主药的空白样品溶液，在上述色谱条件下，取10mu;l，注入液相色谱仪，记录色谱图。色谱图见图1。 2.4 线性关系 精密称取汉防己甲素对照品15.76mg，置50ml 量瓶中，加甲醇稀释置刻度，摇匀，备用。分别精密吸取以上对照品溶液2、4、5、6、8ml，分别置10ml 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，进样测定。以对照品含量为纵坐标，峰面积积分值为横坐标绘制标准曲线，则回归方程为：Y＝7.4924X+29.257，r＝0.9993，表明汉防己甲素在63.04mu;g/ml～315.20mu;g/ml 范围内呈良好的线性关系。 2.5 精密度实验 取对照品溶液重复进样5 次，每次10 mu;l，测得氧氟沙星的峰面积的RSD 为0.75%。 2.6 重复性实验 对同一批粉防己提取物（批号140102），按正文拟订的方法平行测定6 份，结果汉防己甲素含量的平均值为34.0208%（RSD =0.45%，n=6），结果表明，本法的重复性较好。 2.7 稳定性实验 取同一供试品溶液（批号140102）在室温下立即测定，放置4、8、12、16、20、24h 重新测定，结果峰面积测得值分别为1223.5、1224.8、1230.1、1243.5、1218.9、1222.8、1231.1，平均值为71227.814，RSD 为0.61%，峰面积基本一致，表明样品溶液在24 小时内稳定。 2.8 回收率实验 称取已知含量的粉防己提取物约25mg，共9 份，精密称定，置50ml 量瓶中，加甲醇适量，另分别精密量取汉防己甲素对照品溶液（含量为0.302mg/ml）10ml、10ml、10ml、15ml、15ml、15ml、20ml、20ml、20ml，分别加入以上量瓶中，超声30min，取出，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，