双肾一夹型高血压大鼠血管重塑中基质金属蛋白酶-2的表达及替米沙坦的作用.docVIP

精品论文 参考文献 双肾一夹型高血压大鼠血管重塑中基质金属蛋白酶-2的表达及替米沙坦的作用 丁燕程 闫宏 岳建伟（包头医学院第二附属医院心内科 内蒙古包头 014030） 【中图分类号】R543【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）28-0130-02 【摘要】目的 本文通过探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在双肾一夹型高血压大鼠血管重塑中的表达及其调节机制。得出结论：MMP-2可能与高血压血管重塑有关，telmisartan通过降低血压抑制血管中MMP-2的表达，并改善血管重塑。 【关键词】基质金属蛋白酶-2 双肾一夹型高血压 血管重塑 替米沙坦 血管重塑与高血压的发生、发展有紧密联系，血管结构与功能的改变会导致动脉粥样硬化与靶器官的损伤，因此，针对改善血管病变和降压治疗，能够减轻或延缓动脉粥样硬化进展与靶器官的损伤。有报道MMP-2参与外力损伤或球囊损伤后所引起的血管重塑[1???2]，而在双肾一夹（2K1C）高血压大鼠模型中MMP-2的作用机制却鲜有报道。本研究旨在观察2K1C高血压大鼠模型颈总动脉MMP-2的表达及在替米沙坦（telmisartan）干预下MMP-2表达的变化，以探讨MMP-2参与高血压血管重塑的机制与意义。 1材料和方法 1.1材料 1.1.1动物 雄性wister大鼠35只，8周龄，体重150-220g，由内蒙古大学动物实验中心提供，无级别。 1.1.2仪器与试剂 鼠尾测压仪(BP-6动物无创血压测试仪)购于成都泰蒙科技有限公司，形态学图像分析系统（江苏省捷达科技公司），鼠抗人MMP-2单克隆抗体、SP试剂盒、DAB显色剂均购于福州迈新有限责任公司，Telmisartan（安内强）购于苏州东瑞制药有限公司。 1.2实验方法 1.2.1 2K1C高血压大鼠模型的建立与分组 根据文献报道的方法制备2K1C肾性高血压模型，术后2周血压开始升高，4～8周血压稳定在较高水平。多次用鼠尾测压仪测量2K1C高血压模型鼠的收缩压，均在140mmHg以上。将27只2K1C肾性高血压模型大鼠随机分成3组：假手术组（对照组）10只、模型组10只、治疗组7只；假手术组及模型组每天给予2 mL饮用水灌胃，治疗组每日1次给予Telmisartan（7mg/kg溶于2 mL饮水中）灌胃，连续8周。 1.2.2血压测量 将大鼠置于血压测定仪的保温箱内，37 ℃加温15 min，待鼠尾动脉充分扩张，将鼠尾套入套袖，待动物安静后充气，测定收缩压，重复3次，取平均值。每周测量1次，8周后称重并麻醉处死大鼠。 1.2.3血管组织形态学观察 大鼠处死后取颈总动脉制成石蜡切片，常规苏木素-伊红染色，用计算机图像分析系统测量中膜厚度/管腔内径(MT/LD)、中膜面积/管腔面积(MA/LA)和中膜平滑肌层数。 1.2.4S-P免疫组化法检测MMP-2活性 PBS（磷酸盐缓冲液）代替一抗作阴性对照，胃癌组织作阳性对照，取大鼠颈总动脉石蜡切片，脱蜡、水化后用抗原修复，阻断过氧化物酶的活性，滴加鼠抗人MMP-2抗体，生物素标记，DAB显色，苏木素复染，经脱水、干燥、透明、封胶固定，显微镜观察。计算机图象分析软件测量MMP-2的积分光密度值。 1.2.5 统计学处理所有数据用均值plusmn;标准差（xplusmn;s）表示，用SPSS11.5软件进行统计学处理，3组间比较采用单因素方差分析，组间的两两比较采用S-N-K检验，P＜0.05为差异有统计学意义。 2结果 2.1各组大鼠收缩压比较 模型组收缩压显著高于对照组，治疗组收缩压明显低于模型组，差异有统计学意义(P＜0.01）。 2.2各组大鼠颈总动脉血管重塑程度比较 计算机图像分析显示：模型组颈总动脉的中膜厚度/管腔内径、中膜面积/管腔面积、平滑肌层数与对照组相比明显增加，治疗组各项指标与模型组比较明显减低。 2.3 各组动物血管组织MMP-2表达的比较 3组动物组织颈总动脉血管组织MMP-2表达情况显示，模型组中呈现MMP-2高表达，明显高于其他两组。模型组MMP-2的积分光密度值与对照组比较明显增加，Telmisartan组与模型组比较明显减少。 3讨论 本研究应用2K1C 高血压大鼠模型,旨在观察Wistar大鼠血压升高后血管壁组织结构改变及MMP-2表达的变化情况。实验结果显示：模型组与对照组相比，颈总动脉中膜厚度/内径比值、中膜平滑肌层数均明显增加，即随着血压升高，