高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染早期体内增殖规律调查.pdfVIP

·50· Animal Medicine2013 V01．45No．2 HusbandryVeterinary 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染早期 体内增殖规律调查 黄名英1，傅安静1，刘平1，贾秀楼2 (1．成都农业科技职业学院，四川温江611130； 2．江苏天兆实业有限公司，江苏灌南222500) 肉注射、气管接种后，外周血的全血、血清、外周血单个核细胞(PBMC)的ct值，并计算其拷贝数。结果表明肌肉注射和气管接种两种方式均 能对香猪感染成功，但与气管接种相比，肌肉注射能在外周血中先检测到病毒。同一只猪的全血和血清中的病毒含量差异不明显，但PBMC中的 病毒含量却相对要少；HP．PRRSV感染后2～6h，肌肉注射和气管接种后的病毒增殖都较慢，但肌肉注射更易检测到病毒；感染2d后，气管接 种组的病毒增殖迅速，明显高于肌肉注射的增殖速度；感染后2～6d，外周血中的病毒迅速增殖，之后逐渐降低。气管接种组的临床症状比肌肉 注射组的严重。 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒；荧光定量PCR；感染早期；增殖规律 中图分类号：$852．65 文献标志码：B 文章编号：0529-5130(2013)02—0050—05 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)由郭宝清 等首次从国内疑似PRRSV感染猪群中分离¨J。胞培养物无菌分装，于一80℃冻存备用。 1．2试验动物和分组 PRRSV在我国大量传播，并不断进行变异，致使 2006年我国大部分省份流行“猪无名高热”，20073～4月龄，6—8kg体重的医学级香猪(小型 年3月中国农业部正式确定高热病为多病原的混合感 猪)，购自成都达硕生物科技有限公司，试验前经 染，变异的猪繁殖与呼吸综合征病毒是最主要的病 原。2J。高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP． 异性抗体为阴性。将15只香猪随机分成A、B、C、 PRRSV)主要造成母猪繁殖障碍和大量仔猪死亡， I临床表现较为复杂，目前对于HP．PRRSV的临床症D、E5组，每组均为3只，分别肌肉注射1．5mL／只 mL／只 状研究已有大量报道，但对于HP—PRRSV感染早期细胞毒、肌肉注射3mL／只细胞毒、肌注3 mL／只细胞毒、气管接 病毒增殖规律的报道相对较少。本文欲探讨高致病性 DMEM培养基、气管接种1．5 猪繁殖与呼吸综合征病毒通过肌注和气管接种两种方 种1．5 式感染香猪后的病毒增殖规律，以期为进一步对该病 照组。 毒的致病机理研究奠定基础。 1．3主要试剂和仪器 TRIzol 1材料与方法 1．1病毒 RealtimePCRMaster HP-PRRSV分离株(美州型)由西南民族大学 巴细胞分离液，天津灏洋生物制品科技有限责任公司 收稿日期：2012-03—14 作者简介：黄名英(1977-)，女，讲师，主要从事预防兽医学 Themal Cycler，美国Bio-Rad公司。 教学与研究，E-mail：huangmingyin9666@163．eom。