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76株流感嗜血杆菌的鉴定与抗菌药物敏感性分析
精品论文 参考文献
76株流感嗜血杆菌的鉴定与抗菌药物敏感性分析
候明玖1 邱小燕2 郑 威1
(1荆州市江陵县人民医院检验科 434100;2荆州市中心医院检验科 434020)
【中图分类号】R511.7 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)23-0205-02
【摘要】 目的 对76株流感嗜血杆菌进行鉴定和体外药敏试验,为临床合理使用抗生素提供参考。 方法 用巧克力琼脂培养基分离嗜血杆菌,“卫星试验”鉴定流感嗜血杆菌,ATB HAEMO试剂条做药敏试验。 结果 2880例呼吸道感染病人痰中检出124株嗜血杆菌,总检出率为4.3%,其中流感嗜血杆菌76株(6.13%),副流感嗜血杆菌48株(3.87%),阿莫西林/克拉维酸、氧氟沙星、头孢呋辛、氧氟沙星2、头孢噻吩敏感率分别为96%、92%、93.4%、94.7%、89.4%。 结论 通过对流感嗜血杆菌的鉴定与抗菌药物敏感分析,大多数抗生素对流感嗜血杆菌敏感,只有氨苄西林和氯霉素敏感率差,这可能与抗生素经验性用药的种类和方法的不同有关,对流感嗜血杆菌的鉴定与抗菌药物敏感监测,有效指导临床合理用药和预防。
【关键词】 流感嗜血杆菌 鉴定 抗菌药物 敏感 合理用药
流感嗜血杆菌是临床上一种条件致病菌,它是一种没有运动力的革兰阴性杆菌,是排列全数基因体而又能自由生存的生物,只引起人类疾病,侵犯人体的呼吸系统、循环系统、骨、关节系统等多器官部位的病原菌。主要为急性化脓性感染(急性咽炎、喉炎、气管炎、肺炎、败血症、脑膜炎等)[1]。本文对临床标本的分离鉴定和抗菌药物敏感试验,为临床早期治疗提供可靠依据。
材料与方法
1.材料
1.1 标本来源 我院2008年1月-2009年12月临床科室送检痰培养标本,共分离出嗜血杆菌124株。
1.2 培养基 巧克力琼脂培养基(chocolate Agar),为上海锃嘉生物工程有限公司产品。
1.3 ATB HAEMO 嗜血杆菌和布兰汉球菌药敏试剂盒(比色法):氨苄西林、头孢噻吩、阿莫西林/克拉维酸、四环素、氧氟沙星、利福平、氯霉素、头孢呋辛、头孢克洛、利福平2、头孢噻肟、氧氟沙星2,为法国生物梅里埃公司产品。
2.方法
2.1菌株分离鉴定
挑取巧克力平皿上生长的无色或灰白色、透明或半透明、圆形、光滑的菌落,革兰染色镜检为革兰阴性短小杆菌、形态多样的菌落与金黄色葡萄球菌ATCC25923共同接种于血平皿上和M-H平皿上,观察“卫星试验”,副流感只需V因子即生长,能在M-H平板呈卫星生长的菌可否定流感嗜血杆菌[2]。
2.2药敏试验
挑取血平皿上“卫星试验”阳性菌落,用无菌0.85%盐水制备菌悬液,浓度为0.5麦氏浓度,用移液管取50ul该菌悬液到ATB S培养基的安瓿中,用无菌加样枪在每个杯形器中加入135ul ATB S培养基,置于36plusmn;2℃CO2培养箱中孵育18-24小时,通过肉眼观察每个杯形器中的浊度,低浓度和高浓度均澄清,判定为敏感;低浓度为混浊,高浓度为澄清,判定为中介;低浓度和高浓度均混浊,判定为耐药;澄清判定为敏感,混浊判定为耐药。结果评价参照临床和实验室标准化研究所(CLSI)制订《抗菌药物敏感性试验执行标准》(2007年版)。
2.3数据统计学分析
数据采用WHONET5.4软件进行统计分析。
结果
2008年1月—2009年12月2880痰标本中共检出嗜血杆菌124株,其中流感嗜血杆菌76株,副流感嗜血杆菌48株.
结论
由于嗜血杆菌培养需要X因子(氯化高铁血红素)和V因子(NAD)才能生长等多种因素的影响,故检出率一直不高,不能给临床正确的依据,本实验选用巧克力琼脂培养基(血细胞中均含有X、V因子),成功从2880例痰标本中分离了76株流感嗜血杆菌,检出率为6.31%低于简翠等[3]报道。
随着抗生素的不断推陈出新,病原微生物也不断变异适应,使得流感嗜血杆菌耐药菌株逐渐增多,耐药机制也多样化及多种耐药株出现[4],因此临床应重视流感嗜血杆菌药物敏感性监测,这样对于控制感染,降低经验性用药导致的选择性耐药株增多具有重要意义。由表1中看出,氨苄西林和氯霉素敏感率分别为38.0%和36.8%,大部分耐氨苄西林的流感嗜血杆菌都产生TEM型beta;-内酰胺酶使其失去抗菌活性而耐药;阿莫西林/克拉维酸、氧氟沙星、头孢呋辛、氧氟
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