HPLC法测定缬沙坦胶囊的有关物质.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC法测定缬沙坦胶囊的有关物质 李明杰 蒋燕杰 郭中明 罗兆亮 （山东罗欣药业股份有限公司 276000） 【摘要】目的 建立测定缬沙坦胶囊有关物质的HPLC方法。方法 用Diamonsil C18(250mmtimes;4.6mm,5mu;m)色谱柱,以乙腈-水-冰醋酸（500：500：1）为流动相,流速1.0ml?min～(-1),柱温40℃,检测波长230nm,进样量20mu;l。结果 有关物质各杂质峰与主峰之间的分离良好,且已知单个杂质分离良好。结论 该方法准确可靠,专属性强,可用于缬沙坦胶囊有关物质测定。 【关键词】 缬沙坦胶囊 有关物质 高效液相色谱仪 缬沙坦是一种口服有效的特异性的血管紧张素Ⅱ（AT1）受体提起拮抗剂，它选择性地作用于AT1受体亚型，阻断AngⅡ与AT1受体的结合（其特异性拮抗AT1受体的作用大于AT2受体约20,000倍），从而抑制血管收缩和醛固酮的释放，产生降压作用。临床用于治疗轻、中度原发性高血压[1]。《中国药典》2010年版收载了缬沙坦原料药及胶囊的含量和有关物质测定方法,本次实验采用《中国药典》2010年版HPLC法对缬沙坦胶囊进行有关物质方法学研究，并与国内上市缬沙坦胶囊质量作了系统的比较。 1 方法与结果 1.1 色谱条件与系统适用性[2] 色谱柱：Diamonsil C18(250mmtimes;4.6mm,5mu;m)；柱温：30deg;C；流动相：乙腈-水-冰醋酸（500：500：1）；流速：1.0ml/min；进样量：20mu;l；检测波长：230nm。 1.2 专属性试验 空白干扰试验：精密量取空白溶剂20mu;l，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明，空白溶剂不干扰本品的有关物质测定。按处方配制不含缬沙坦的空白样品，作为供试品溶液。精密量取续滤液20mu;l，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明，空白辅料不干扰本品的有关物质测定。 酸破坏试验：取本品的细粉适量，置100ml量瓶中加流动相制成每1ml中含缬沙坦1mg的溶液，摇匀，滤过，取续滤液作为储备液。精密量取上述溶液5ml，置10ml量瓶中，再加1mol/L的盐酸溶液1ml，摇匀，室温放置60分钟后，用1mol/L的氢氧化钠溶液调pH值至中性，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为酸破坏溶液。同法制备酸空白溶液。 碱破坏试验：做法同上，用1mol/L的盐酸溶液调pH值至中性，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为碱破坏溶液。同法制备酸空白溶液。 高温破坏试验：做法同上，放置80℃水浴中加热48小时，取出，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为高温破坏溶液。同法制备高温空白溶液。 氧化破坏试验：做法同上，加30%双氧水5滴，摇匀，室温下放置48小时，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为氧化破坏溶液。同法制备氧化空白溶液。 光照破坏试验：做法同上，置光照度为4500lx环境中放置3天，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为光照破坏溶液。同法制备光照空白溶液。 分别精密量取上述溶液各20mu;l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。在此色谱条件下本品所含各种杂质均能与主峰完全分离，因此，采用上述色谱条件能够测定本品的有关物质。 1.3 方法学考察 1.3.1 定量限、检测限 精密称取缬沙坦对照品适量，加流动相适量溶解并定量稀释。经试验溶液的色谱图中，信噪比约为3:1，缬沙坦检测限为25ng，信噪比约为10:1，定量限为100ng。 1.3.2 线性关系试验 取缬沙坦对照品适量，精密称定，置于量瓶中，加流动相适量，振摇使缬沙坦溶解，并分别稀释制成每毫升含0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ug的溶液。各取20mu;l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积对浓度作曲线，并计算回归方程Y=98.56X+107.63,r=0.9999。结果表明，缬沙坦在0.1mu;g/ml～0.9mu;g /ml浓度范围内与峰面积呈良好线性关系。 1.3.3 精密度试验 取上述自身对照溶液注入液相色谱仪，连续进样6次，记录色谱图及峰面积。结果所用仪器具有良好的精密性。 1.3.4 稳定性试验 取上述供试品溶液20mu;l分别于0、2、4、6、8、12小时，注入液相色谱仪，记录色谱图及峰面积。结果RSD为0.45%，表明供试品溶液在室温条件