HPLC测定对氨基水杨酸钠药物中间氨基酚的应用.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC测定对氨基水杨酸钠药物中间氨基酚的应用 王奎1 邵东2 黄琳2 （1杭州艾森医药研究有限公司 310030） （2常州四药制药有限公司 213004） 【摘要】目的 建立与探究通过HPLC法测定对氨基水杨酸钠药物中的间氨基酚的方法。方法　填充剂使用十八烷基键合硅胶,流动相采用0.05mol/L的磷酸二氢钠-甲醇-0.05mol/L的磷酸氢二钠。结果　间氨基酚的线性范围为0.603至7.239ug/ml（r=0.9997），定量限为3.5ng，检测限为1.3ng，回收率为99.83%，RSD为0.82%（n=6）。结论　采用HPLC法测定对氨基水杨酸钠药物中的间氨基酚十分可靠，结果准确，操作简单。 【关键词】 高效液相色谱法 对氨基水杨酸钠 间氨基酚 【中图分类号】R927.2 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2013）21-0328-02 对氨基水杨酸钠，因其能够抑制结核菌的对氨基苯甲酸的合成而达到了抑制细菌生长的作用，临床上为常用的抗结核药物[1]。由于该药物存在一定的副作用，因此该药物中各有关物质的含量需要严格地进行控制。传统的检测仅对总的有关物质和单个有关物质进行控制，并未对其中的杂质进行定性。本文旨在建立与探究通过HPLC法测定对氨基水杨酸钠药物中的间氨基酚的方法。 1 实验仪器及试剂 1.1 仪器： Waters高效液相色谱仪（包括717型泵，717型双通道紫外检测器，717型自动进样器）C18色谱柱（大连依利特，规格为150mmtimes;4.6mm，5um）。 1.2 试剂： 磷酸二氢钠（分析纯）、甲醇（色谱纯）、磷酸氢二钠（分析纯），以上试剂均由北京化工厂提供。对氨基水杨酸钠对照品、对氨基水杨酸钠原料药、间氨基酚对照品（所有药物均由北京紫竹药业有限公司生产）。 2 方法与结果 2.1 试验条件 填充剂使用十八烷基键合硅胶,流动相采用0.05mol/L的磷酸二氢钠-甲醇-0.05mol/L的磷酸氢二钠，比例为425:150:425。检测波长：280nm。 流速设置为1.0ml/min。柱温为室温。 2.2 方法验证 2.2.1 系统适用性试验 记录测定各组溶液的色谱图，间氨基酚和对氨基水杨酸钠的分离度为5.22，分离情况良好。溶剂对测定不产生干扰。此外，理论板数以间氨基酚计为2182，拖尾因子1.03，均符合相关规定。 2.2.2 检测限与定量限试验 采用流动相对间氨基酚对照品进行逐级的稀释，记录色谱图。通过检测测得间氨基酚的定量限为3.5ng，而检测限为1.3ng。 2.2.3 线性试验 精密地称取12.08mg间氨基酚的对照品，加样至100ml的容量瓶，并加入流动相，混合稀释，摇匀。精密地分别吸取0.5,1.0,2.0,3.0,4.0, 5.0,6.0ml于不同的100ml容量瓶，分别加入流动相混合稀释，摇匀，以此作为标准溶液。分别再取20ul注入色谱仪，记录相应的色谱图。根据所测色谱图，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行回归分析。通过测定可得到回归方程为A=1.2765times;107C+184.63，r=0.9997，在0.603至7.239ug/ml范围内的线性关系尚可。 2.2.4 精密度试验 将20ul的间氨基酚对照品溶液注入液相色谱仪，重复进样操作6次，进行计算。计算结果RSD为0.82%。 2.2.5 回收率试验 取约69mg左右的对氨基水杨酸钠（已测定间氨基酚含量），分别放置于6个不同容量瓶。其中往1号与2号瓶中各加入间氨基酚1.ml（约0.1208mg间氨基酚），而3号和4号加入2.0ml，5号和6号瓶加入3.0ml，分别测定，并记录色谱图。根据样品间氨基酚含量、加入量、测得量以及回收率计算平均回收率，结果为99.83%。 3 讨论 虽然目前口服对氨基水杨酸钠抗结核已经不再采用，但通过静脉滴注给药对于长期存在发热、中度症状的肺结核患者仍有一定的疗效。据有关研究表明[3]，该药物在一些肺结核患者中存在独特的疗效，但其各组分需要严格的控制。为了更好地在临床上使用该药物，避免一些药物的不良反应，需要建立起检测对氨基水杨酸钠的各组分的含量。目前临床上采用HPLC的方法具有很多优点，