HPLC法测定镇心痛颗粒中人参皂苷Rb1 的含量 朱秋颖.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC法测定镇心痛颗粒中人参皂苷Rb1 的含量 朱秋颖 朱秋颖 （赤峰丹龙药业有限公司　内蒙古赤峰　024000） 【中图分类号】R445【文献标识码】B【文章编号】1672-5085（2012）10-0253-01 【摘要】 建立HPLC法测定镇心痛颗粒中人参皂苷Rb1含量的方法。采用Kromasil C18（250times;4.6mm，5mu;m）色谱柱，乙腈-水为流动相（梯度洗脱），检测波长为203nm。柱温：36℃；流速：1.0ml/min；线性范围为676～21.125mu;g/ml，平均回收率为99.17%，RSD为2.00%。该方法简便、可靠、准确，可用于该制剂的质量控制。 【关键词】人参皂苷Rb　高效液相色谱法　镇心痛颗粒 镇心痛颗粒是由党参、三七、延胡索（醋炙）等9味药组成。具有益气活血，祛痰通络，宽胸止痛作用。用于气虚血瘀痰阻型胸痹，症见胸痛、胸闷、心悸、气短、乏力、舌暗有瘀斑、苔白腻、脉弦细或濡，及冠心病心绞痛等症。其主要成分三七（Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen）含有人参皂苷Rb1和人参皂苷Rg1等成分，人参皂苷Rb1为其主要有效成分之一。 1 仪器和试药 Agilent1100高效液相色谱仪，QuatPump泵，VWD紫外-可见检测器，Agilent 全自动进样器，Agilent色谱工作站。 乙腈为色谱纯（Merk LTD.），水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。人参皂苷Rb1对照品为分析纯（中国药品生物制品检定所提供，批号：11074-200216）。镇心痛颗粒（圣龙药业有限责任公司）。 2　色谱条件 色谱柱： Kromasil C18（250times;4.6mm，5mu;m），淮阴汉邦科技有限公司。 流动相：25%乙腈为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱；检测波长为203nm；流速：1.0ml/min；进样量：5mu;l 。理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于3000。 3　方法与结果 3．1线性范围的考察 人参皂苷Rb1的标准曲线：精密称取60℃干燥至恒重的人参皂苷Rb1标准品6.76mg于10mL容量瓶中，加流动相A稀释至刻度，制成人参皂苷Rb1标准贮备液（676mu;g/mL）。 分别配成338mu;g/mL、169mu;g/mL、84.5mu;g/mL、42.25mu;g/mL、21.125mu;g/mL的人参皂苷Rb1系列对照品液；分别吸取上述溶液5mu;l,注入液相色谱仪，测定，以峰面积为纵坐标（Y），对照品浓度（mu;g /mL）为横坐标（X），绘制标准曲线，得回归方程：Y＝1.68X+9.851； R＝1。人参皂苷Rb1浓度在676～21.125mu;g/mL之间呈良好的线性关系。 3.2 供试品溶液的制备 取重量差异项下的内容物,研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加约20mL水超声使溶解，加乙醚振摇提取2次，每次20mL，弃去乙醚层，水层用水饱和的正丁醇提取6次，每次20mL。合并正丁醇液，加水20mL洗涤，分出水层，用水饱和的正丁醇提取3次，每次10mL，与上述正丁醇合并，水浴蒸干，残渣用少量25%乙腈溶解转移至50mL量瓶中，并用25%乙腈分次洗涤容器，洗液并入量瓶中，加25%乙腈稀释至刻度，摇匀，即得。 3.3 空白试验 原方去三七药材，按制剂工艺法进行制备得缺三七的空白制剂。取该空白制剂1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加约20mL水超声使溶解，加乙醚振摇提取2次，每次20mL，弃去乙醚层，水层用水饱和的正丁醇提取6次，每次20mL。合并正丁醇液，加水20mL洗涤，分出水层，用水饱和的正丁醇提取3次，每次10mL，与上述正丁醇合并，水浴蒸干，残渣用少量25%乙腈溶解转移至50mL量瓶中，并用25%乙腈分次洗涤容器，洗液并入量瓶中，加25%乙腈稀释至刻度，摇匀，得空白供试品溶液，按含量测定方法分析，空白样品色谱在人参皂苷Rb1相应保留时间上没有干扰峰。 3.4精密度试验 同一供试液（批号050102），依法测定，连续进样6次，按供试品测定项测定人参皂苷Rb1峰面积，计算人参皂苷Rb1的精密度。测得人参皂苷Rb1的RSD为1.07%，结果符合要求。 3.5回收率试验 取含量已测定的制剂（批号050102），进行加样回收率试验。取本品5袋 ，研细，分别取三份，每份0.1g，置具塞锥形瓶中，分别精密加入人参皂苷Rb1对照品溶液（0.3