重组猪白细胞介素2在小鼠模型中对伪狂犬病毒弱毒疫苗的佐剂效应.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第七次学术研讨会论文集(2004年) 重组猪白细胞介素2在小鼠模型中对伪狂犬病毒弱毒疫苗的佐剂效应 严琳，牟帆，陈焕春+ 3007 (华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室，武汉4 0) coli表达的IL-2，ErlL-2与酵母表达 本试验以两种猪IL．2重组蛋白(rIL一2，包括E Virus，PrY)弱毒疫苗的佐剂，进行小 的1L．2，YrIL．2)作为伪狂犬病毒(Pseudorabies 鼠模型试验，检测rlL．2对该疫苗的佐剂效应。试验中．16只小鼠被随机分为4组，分别 合。酋免2周后加强免疫，在首免2周，4周及6周时进行小鼠尾静脉采血，分离血清作 ELISA检狠0，结果发现rlL．2对PrV弱毒苗引发的体液免疫应答有显著增强作用，而且 不同试验组的免疫保护力，初步鉴定rIL-2对小鼠有一定的保护作用。 关键词：白细胞介素2；佐剂；PrV弱毒苗；保护力 接种疫苗是最有效的感染预防措施之一。但现行疫苗由于普遍存在安全性与免疫性 的问题，使用时具有一定的局限性I”。提高疫苗效价，使其能引发机体产生足够强烈的免 疫反应是现阶段疫苗研究的一个重要任务I_I。佐剂能以非特异性的方式增强针对特异性抗 原的免疫力pl，常被用于提高抗原的免疫原性，在抗原有限的情况下增强免疫反应，诱导 免疫受损机体的免疫反应和提高机体的细胞免疫或体液免疫力m”。几十年以来，众多研 究证实了IL．2作为疫苗佐剂用于治疗多种感染性疾病(包括病毒，细菌．真菌及寄生虫 感染)时，都表现出了良好的疗效15,6．71。例如，IL．2能有效增强胸膜肺炎副猪嗜血杆菌(H 使用能使机体产生长久的免疫力【9】。但实际上IL．2本身并无直接的抗感染，抗病毒能力。 而是通过增强机体的免疫功能如体液免疫力和细胞免疫力，从而介导上述保护作用的。IL．2 能有效的诱导T淋巴细胞增殖(从G。期进入S期)和分化，而且T细胞受多种刺激后能 产生IL．2，产生的IL．2又作用于T细胞本身，诱导自身增殖，分化和发挥功能[ioII，12]。 同时，IL一2还能增强CTL的细胞毒活性，NK活性，增加细胞内pH，诱导IL．2受体(IL．2R) 表达，促进细胞移动，增强细胞问的接触，诱导细胞分泌细胞因子如IFN．，等。尽管多数 研究强调的是IL-2对于增强细胞免疫力如提高CTL活性的重要作用，仍有不少试验表明 IL一2有时对体液免疫也有重要调节作用。因为IL．2也具有刺激B细胞增殖的活性，从而 可以提高体液免疫水平。例如，IL-2作为BVDV(牛病毒性腹泻病毒)DNA疫苗的佐剂后 能提高血液中特异的抗体水平m】。但IL-2对B细胞的作用是问接的，当IL．2刺激Th细 ‘作者简介：严琳(1 980年一)女，浙江东阳人，博士研究生，主要从事病毒分子生物学研究。 Tel：027E-mail：yanl{na¨n@yahoo．com．cn ‘通讯作者 中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第七次学术研讨会论文集(2004年) 胞，特别是Th2细胞后，会产生Th：细胞因子，包括IL．4。IL．6和专门的B细胞生长因子 并有助于IL．4诱导的IgE的合成。因此Th细胞是IL．2与B细胞间的重要桥梁【l”。 弱毒苗韵佐剂免疫小鼠。通过ELiSA方法检测不同免疫物所产生的盘清抗体水平，以及 攻毒试验，来评估IL．2对伪狂犬病毒(PrV)弱毒苗的佐剂效应。 l材料与方法 1．1试验材料 6～8周龄BaIB／C雌鼠购自武汉生物制品研究所，免前检测均为Pry阴性。Prv弱毒 苗(冻干苗)以及弱毒苗稀释液均由华中农业大学科前动物生物制品有限公司提供。Prv 野毒EA株。由本室分离保存。重组猪IL-2(包括大肠杆菌表达的EIL．2和酵母表达的 提供．活性已测)。ELASA检测所需的羊抗鼠IgG为华美公司产品。 1．2试验程序 将20只Balb／C雌鼠随机分为4组(5只／组)。一组注射o．85％NaCI100¨l作为空白 对照组C组，剩余3组试验组腹腔注射Pry弱毒苗100|Ll。自接种疫苗开始，试验组分 每日注射两次(上、下午各一次)，连续注射3天