三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用.pdfVIP

三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用.pdf

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《中国癌症杂志》2008年篇18卷第4期 2∞8Vol。18 £}耋INA0NCOLOGY No.4 2∞ 位点短发卡状RNA在提高RNA 干扰效率中的作用 [摘要]背景与目的:shRNA技术是近来发展的热点技术之一,但普遍采用的单位点shRNA干扰载体效果并 不理想。本研究探讨三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用。方法:构建外源熬因DsRed全长载体 段shRNA。转染293/DsRed,荧光驻微镜观察基因DsRed。应用实时定量PCR(Real—timePCR)和流式细胞仪 可以提高对靶基因的干扰效率。 [关键词】 RNA干扰;外源基因;DsRed;短发卡状RNA 孛黧分类号:R730.2文敲标谖褐:A 文章编考:1007-3639f2008;04-0249-05 Effectofthreedifferentshort in RNAstheenhancementofRNAinterferenceW德ⅣGYan。 hairpin 洳,WENGDan—hui。XLAXi,SONG Shi-xuan,MA Xiao—hong,LUYun-ping,WANGDing,WANG Obstetricsand to Medical Chang—yu(Departmentof Gynecology,TongfiHospitalAffiliatedTongfi College, Scienceand Hubei HuazhongUniversityof Technology,Wuhan430030,China) to:溅ⅣG CorrespondenceChang.yuE.mail:tjwcy@yahoo.con。en and skillisoneofthehottestintheareaofcancer 【Abstract】Backgroundpurpose:shRNA spots biology recently, itsresultisnot is thatthe vectorcontainoneshRNA investi- though veryeffective,Itpossible interfering only fragment.We the ofRNAinterferencethreeshRNAs.Methods:VectorofDsRedwas and gatedefficacy byusing designedconstructed, and transfectedintoHEK293 with vectorhasmenobtained vectors cells,cells stablyexpressin’g byscreening。Fourtarge— DsRedwere and withthreedifferentshRNAsandotherthreewith oneofthreeshRNAs. ting designedconstructed,one

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