聚山梨酯80修饰的聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒提高甲氨蝶呤大鼠脑内浓度研究.pdfVIP

聚山梨酯-80 修饰的聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒提高甲氨蝶呤大鼠脑内浓度 高科攀 蒋新国 复旦大学药学院药剂学教研室 摘要 血脑屏障是由毛细血管内皮细胞形成的血液与脑组织间的屏障 总的来说 亲水性 大分子药物 难以透过BBB抗癌药物甲氨蝶呤就属此类 临床上采用鞘内注射的给药方式来弥补 但手术要求高 危险性大 患者顺应性差 可生物降解的材料聚氰基丙烯酸酯很早就制成纳米粒 用于药物缓控释以 及被动肝 脾靶向 近年来有研究表明该材料纳米粒经聚山梨酯-80 表面修饰后能协助药物透过血脑 屏障 显示出新的应用前景 用该材料载带甲氨蝶呤有望通过静脉给药获得较高脑内药物浓度 本实验用乳化聚合法在酸性条件下制备了甲氨蝶呤-聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒 在中性条件下 使反应完全 制得的纳米粒粒径均匀 服从高斯分布 大小在 140nm 左右 再经超滤纯化浓缩 去 除游离药物 纯化后的纳米粒用DMSO 溶解 在313nm 波长下测UV 吸收 计算载药量 用聚山梨 酯-80 修饰后立即静脉注射 剂量为3.2mg kg- 1 与市售注射用粉针剂比较 于0.5, 1, 1.5, 2, 3, 4 h 取脑脊液和大 小脑组织 用HPLC-UV 外标法测定药物浓度 其中脑脊液样品离心后直接进样 脑 组织样品用高氯酸沉淀蛋白后取上清液进样 结果药物浓度在脑脊液和大 小脑组织中分别于1 h和 1.5 h 达峰 纳米粒给药组大鼠脑脊液 脑组织中Cmax 和AUC0 t 均显著高于粉针剂给药组 P0.01 其中脑脊液药物Cmax 和AUC0 t 提高2 倍 脑组织药物 Cmax 和AUC0 t 提高3 倍 纳米粒给药后可在 一定程度上延长脑内药物滞留时间 给药后4 h 仍可在脑脊液 脑组织中检测到药物 文章最后提出药物理化性质影响聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的载药量 进而可能影响纳米粒脑内 递药能力的发挥 今后研究的侧重点应该在影响因素考察和入脑机理探讨两方面 关键词 纳米粒 聚氰基丙烯酸正丁酯 甲氨蝶呤 血脑屏障 抗癌药物甲氨蝶呤(Methotrexate MTX)可用于急性白血病和中枢神经系统肿瘤的化学治疗 由 于该药不易透过血脑屏障 blood brain barrier BBB 临床上采用鞘内注射的给药方式来弥补 可瞬 间获得较高的脑内药物浓度 但该途径手术要求高 危险性大 患者顺应性差 近年来国外有报道 聚山梨酯-80 修饰的聚氰基丙烯酸烷基酯纳米粒可协助药物透过BBB[1-4] 以纳米粒为载体使药物透过 BBB 国内尚无文献报道 本实验以 MTX 为模型药物 评价了聚氰基丙烯酸正丁酯 (polybutylcyanoarylate, PBCA)纳米粒的脑内递药能力 1.仪器与试剂 1.1 仪器 S23-2 转速显示恒温磁力搅拌器 UV-2401PC 型紫外分光光度计 LC- 10AT VP 型高效液相色谱 仪 NICOMP 380ZLS 激光纳米粒度仪 杯式超滤器 1.2 试剂 MTX 原料药 MTX 注射剂 氰基丙烯酸正丁酯 butylcyanoarylate, BCA, PluronicF68 乌 拉坦 高氯酸等均为市售分析纯试剂 1.3 动物 SD 大鼠 雄性 体重190-220 g 2. 方法 2.1 PBCA-MTX 纳米粒制备及纯化 PluronicF68 和MTX 原料药共同溶解在50 mL pH=2.0 的HCl 介质中 在磁力搅拌下缓缓向上述 溶液中滴加BCA 搅拌3 h 后用NaOH 调节pH 至6~7 继续搅拌2 h 即得PBCA-MTX 纳米粒乳液 将上述纳米粒乳液置于超滤器中 用截留分子量5 万的超滤膜 在N2 正压力下对纳米粒进行纯 化 除去游离药物 截留的载药纳米粒用蒸馏水清洗3 次 得纯化的纳米粒乳液约10mL 用于给药 2.2 PBCA-MTX 纳米粒粒径及MTX 含量测定 用激光纳米粒度仪测定纯化的载药纳米粒粒径 精密吸取0.1mL 纯化的纳米粒乳液 用二甲亚砜溶解并定容至5mL 在313nm 波长下测定UV 吸收值A 代入标准曲线 计算MTX 含量 2.3 动物实验与样品采