薄层扫描分析修改.pptVIP

实习名称 薄 层 扫 描 分 析 喻彦林 ;序-薄层色谱（TLC）发展历史 1938年俄国人首先实现了在氧化铝薄层上分离一种天然药物。1965年德国化学家出版了“薄层色谱法”一书，这一技术日趋成熟。 70年代中后期发展了高效薄层色谱。80年代以后发展了薄层色谱光密度扫描仪，和各步操作的仪器化，并实现了计算机化。 方法特点：设备简单，分析速度快，分离效率高，结果直观，定性和半定量;一、薄层扫描定量分析原理： 用一束长宽可调的一定波长和强度的光照射到薄层斑点上进行整个斑点扫描，用仪器测量通过斑点或被斑点反射的光束强度的变化达到定量的目的。 斑点扫描积分面积—物质含量;二、薄层扫描仪组成： 主机：光源：可见光源 钨灯 400-800nm 紫外光源 氘灯 200-400nm 荧光激发光源 分光器：光栅 200-800nm 检测器：光电倍增管PMT CCD/CMOS 直接成像 ;薄层色谱扫描仪测光形式 单波长单光束 单波长双光束;光;反射法 光源与检测器在薄层板同侧。光源发出的光经单色器成为一定波长的单色光，光束照到薄层斑点上，部分被薄层吸收，部分经过漫反射又折回表面成为反射光，测量反射光强度，得到反射光谱。 反射吸收度与物质含量有确定关系，可进行定量。;薄层色谱扫描仪扫描方式 直线扫描——用一束比斑点宽度略宽的光作一个方向的等速扫描 锯齿扫描——用微小的正方形光速在对斑点进行Y轴等速直线扫描的同时对斑点进行X轴等辐往复扫描，光束运动轨迹呈锯齿形。;斑点;定性 ﹡斑点的Rf值 ﹡斑点的光谱扫描：利用薄层扫描仪 颜色斑点：钨灯 400-780nm 无色有紫外吸收斑点：氘灯200-400nm 定量：直接定量-薄层扫描法 外标法、内标法、归一化法;;应用;三、分析样品：1、蓝色圆珠笔油墨染料成分分析 计算各染料斑点的Rf值和百分含量    仪器测定参数 测光形式：单波长单光束 测定波长：580nm 测定方法：反??法 扫描方式：锯齿扫描 扫描原点—溶剂前沿;不同种类蓝色圆珠笔油样品薄层色谱图;案例1：利用真实文书变造（蓝色圆珠笔）;案例3：利用真实文书变造（换页）;2、大红粉染料的定量分析 测定未知浓度的大红粉染料   仪器测定参数 测光形式：单波长单光束 测定波长：510nm 测定方法：反射法 扫描方式：锯齿扫描 只扫描大红粉红色斑点;A1;;;;完