代谢工程的原理及应用.pdf

中.价钧生.妞艰华索研讨会 (2000。石介庄)论文. 代谢工理的万理及应用 张惠展 吴海珍 孙丽萍 华〔东理工大学生物工程学院，上海 200237) 摘 要 代谢工程哪etabolicEngineering),)F称途径工程 (PathwayEngineering)和 代诩设计(MetabolicDesign)，是一门利用分子生场学原理系统分析细胞代谢网络、 并通过DNA重组技术合理设计细胞代谢途径及遗传修饰，进而完成细胞特性改造的 反用性学科.鉴于它涉及到多基因的联合协同表达控制机制，与传统的蛋白多肤单 基因表达 (第一代基因工程〕以及基因定向突变 (第二代基因工程)已有显著区别， 故作者将之看作为第三代基因工程 本文列举部分代谢工程的应用实例，并对代谢 工程的若干应用战略进行了概括性总结. 关.饲 代谢工程，、第三丧基因工程，应用战略 1 祖论 牛命的代谢活动是通过活细胞和细胞群的代谢网络进行的，后者由一系列酶催化的级联化 学反应以及特异性的膜转移系统所构成。然而，活细胞这种自身固有的代谢网络相对实际应用 而言其遗传特性并非最佳的，这就需要对细胞的代谢途径进行功利性的修饰!},。代谢T程的基 木vi论及其应用战略就是在这一发展背景下形成的 1974年，Chakrabarty}在假单抱曲P.paid 和P.aeruginosa中分别引入几个稳定的重组质粒，增加了两者对樟脑和茶的降解催化活性 这 是代谢工程的第一个应用实例，标志着代谢土程作为一门学科的诞生 二十多年来，随着DNA重组技术的日趋成熟，代谢上程的碑论和应用也得到了迅速发展 表1列举了迈几年来代谢土程概念的演变过程 表1 代合工租报金的演交 名称 定义 参考文献 途径丁程 微‘生物) 利用TINA重组技术修饰各种代谢途杆 (包括生物体非固}h M.Quhq.1988 的代it途径〕，提高特定代谢物的x盆 代谢下程 利用DNA重组技术优化细胞的酶活、运输和调控功能，提 Bailcy,19910 高细胞活力 代谢途径T程 生化途径的修饰、设计与构建 Tongee司，1991 代谢T程 利用DNA盆组技术对代谢进行目的性修饰 Cemiron,1993 it径工程ife谢设计 改造细Id代谢途径 提高天然最终产物产Jit或合成新产物 包〔 Picpabcrg,1994 括中间产物或修饰型最终产物) 代心工程 对生化反应的代谢网络进行月的性修饰 Cregary，1994 代喇工界 为达到所需目标对活细胞的代谢途径进行修价 William, 1995 代侧工程 利用分子生物学原理系统分析代谢途释.设计合理的遗传修 K.R,l, 9990 饰战略从而优化细胞生物学特性 中一摘.生.妞术学术研讨会 。目旧，石.庄)论文扭 专.饱文 代谢工程发展早期，人们注重的是应用过程中采用的方法及所达到的目的，通常是对特定 的代谢途径进行改造，因此当时的代谢工程是多个应用卖例的堆积，尚未形成自己的基本理论 体系 9191年，B翻叮在 cs《eince》上发表的题为 “Tow到acsci讹eofMetbaolciFngi邢ernig’’ 的文章，则被认为是代谢1程向一门系统的学科发展一个转折点。目前，代谢工程发展的典烈 目标是: )1〔提高细胞现存代谢途径中天然产物的产量:丈)2 改造细胞现存代谢途径，使其 合成新产物，这种新产物可以是中间代谢产物或修饰性的最终产物:3(〕对不同细胞的代谢 途径进行拟合