第七章--毛细管电泳法.pptVIP

第七章 毛细管电泳法Capillary Electrophoresis, CE 毛细管电泳是带电粒子在电场力的驱动下，在毛细管中按其淌度或和分配系数不同进行高效、快速分离的电泳新技术，也称为高效毛细管电泳。 20世纪30－40年代 蒂塞利乌斯 (A.W.K.Tiselius）建立了移动界面电泳，将电泳发展成分离技术 获得1948年诺贝尔化学奖 第七章 毛细管电泳法(Capillary Electrophoresis, CE) 1 毛细管电泳的原理 2 分离模式 3 进样与检测 4 毛细管电泳的应用与进展 第7章 毛细管电泳7－1 毛细管电泳的原理 1 装置 毛细管 数据处理 电极 检测器 电极 试样 缓冲液 缓冲液 高压电源 （可高至30KV） 第七章 毛细管电泳 7 毛细管电泳的原理2 电泳和电渗 电泳 是指在电场作用下，溶液中的带电粒子作定向移动的现象。 电渗 是指在电场作用下，毛细管或固相多孔物质内液体沿固体表面移动的现象。 第7章 毛细管电泳 毛细管电泳的原理2 电泳和电渗 电泳 行为与特性使用淌度描述 即单位场强(E)下离子的平均电泳速度υ μep=υ/E 实验中，只发生电泳时有效淌度 μef =υef ﹒ (L /V) =( l / tm )﹒(L /V) 毛细管有效长度 迁移时间 毛细管总长度 电压 第7章 毛细管电泳 毛细管电泳的原理2 电泳和电渗 电渗 与固液界面的双电层有着密切的关系 在毛细管壁双电层的扩散层中的阳离子，相对于毛细管壁的负电荷表面，形成一个圆筒形的阳离子鞘，在电场作用下，溶剂化了的阳离子，沿滑动面与紧密层作相对运动，携带着溶剂一起向阴极迁移，便形成了电渗流（electroosmotic flow ,EOF）。 第7章 毛细管电泳 毛细管电泳的原理2 电泳和电渗 电渗流的流型特点 电渗流 HPLC 塞流 层流 第7章 毛细管电泳 22－1 毛细管电泳的原理2 电泳和电渗 电渗流的表示 电渗流的大小可用淌度(μeo)或电渗流系数表示 μeo =υeo / E = l /( teo﹒E ) 电渗流速度 毛细管有效长度 电渗流流出时间 电场强度 第7章 毛细管电泳 7－1 毛细管电泳的原理2 电泳和电渗 电渗流的意义 电泳过程中，伴随着电渗现象 电渗流的速度比电泳速度快5－7倍 利用电渗流可将正、负离子或中性分子一起向同一方向，产生差速迁移，在一次电泳操作中同时完成正、负