毛细管电泳及汞形态分析.pptVIP

毛细管电泳技术及汞形态分析 主要内容 1、概述 电泳是电解质中带电粒子在电场力作用下，以不同的速度向电荷相反方向迁移的现象。利用这种现象对化学和生物化学组分进行分离的技术称之为电泳技术。 毛细管电泳(CE)又称高效毛细管电泳(HPCE),是指离子或带电粒子以毛细管为分离室,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的液相分离分析技术。 1、毛细管电泳技术发展历史 2 毛细管电泳技术的原理 电渗现象：毛细管电泳所用的石英毛细管柱，在pH3情况下，其内表面带负电，和溶液接触时形成一双电层。在高电压作用下，双电层中的水合阳离子引起流体整体朝负极方向移动的现象 。 电渗析流（electroosmotic flow ，简称EOF）：电渗现象中整体移动着的液体。 2 毛细管电泳技术的原理 毛细管电泳原理：粒子在毛细管内电解质中的迁移速度等于电泳和电渗流(EOF)两种速度的矢量和。正离子的运动方向和电渗流一致，故最先流出；中性粒子的电泳速度为“零”，故其迁移速度相当于电渗流速度；负离子的运动方向与电渗流方向相反，但因电渗流速度一般都大于电泳流速度，故它将在中性粒子之后流出，从而因各种粒子迁移速度不同而实现分离。 2 毛细管电泳技术的原理 电渗析流的作用：１、使液体沿毛细管壁均匀移动； ２、使携带不同电性的分子均向负极移动，中性分子也随着电渗流一起移动。 2.1、毛细管电泳仪工作系统 2.1毛细管电泳仪工作系统 2 毛细管电泳技术的原理 2.2、毛细管电泳的分离模式 2.3、检测技术 对于毛细管分离技术而言，极细的毛细管孔径虽然给这项技术带来了极高的分离效能，但同时也给检测器的配备带来了极大的困难，由于毛细管本身的内径极小，而被分离各组分又不能有显著的展宽，因此研制高灵敏度的检测器就成为毛细管电泳这项分离技术需要研究的重要方面之一。 迄今为止，毛细管电泳常用的检测方法有：紫外-可见光吸收、荧光、电化学、质谱、激光诱导荧光检测等。在商品化的仪器中常用的检测其主要是紫外检测器和荧光检测器 2.4、HPCE与HPLC区别 2.4、HPCE与HPLC区别 其次，分离原理不同，致使分离物质不同 。 高效液相色谱根据各组分在流动相和固定相之间的分配比不同，实现达到分离的目的，适合分离沸点高的大分子物质。 CE根据带电粒子在毛细管内电解质溶液中的迁移速度 不同达到分离目的。 3、毛细管电泳技术的特点 仪器简单、易自动化 电源、毛细管、检测器、检测池 分析速度快、分离效率高 在3.1min内分离36种无机及有机阴离子，4.1min内分离了24种阳离子；分离柱效：105～107万/m理论塔板数； 操作方便、消耗少 进样量极少，水介质中进行； 高分辨率 理论塔板数高达数百万块，甚至数千万块。 高灵敏度 可检测出低至10-21 mol/L浓度的物质。 3、毛细管电泳技术的特点 4、CE汞形态分析 Yin 为了改善 CE-UV 较低的检出限利用了 2 次浊点萃取法对 4 种形态的汞(MeHg、EtHg、 PhHg、 IHg)进行萃取，然后利用 4 种形态的汞与 1-(2-吡啶)-2-萘酚形成疏水络合物，再被提取到Triton X-114 表面活性剂等有机相中， 加入 L-半胱氨酸的水溶液进行反萃取，再进入 CE-UV 进行形态分析，检出限分别为 47.5 42.7 4.1 和 10.0 g/L(以 Hg 计)。 4、CE汞形态分析 conditions： a mixture of 100mmol L?1 boric acid and 10% (v/v) methanol (pH 8.5) was chosen for the further works. A much short analysis time was achieved with the on-column detection over the CE hyphenated technique with 15 kV of the separation voltage. 4、CE汞形态分析 采用 CE 进行汞形态分析时不需要被衍生，需与配位剂混合，在电解质溶液中形成带电物质，半胱氨酸是 CE 中常用的配位剂。 Medina等将各种有机汞化合物转化成有机汞与胱氨酸的络合物，在100mmol/L 硼酸钠电解质溶液中形成带电物质用，CE-UV在12 min内完成了分离检出限为0.130 mg/L。 卢瑞宏应用 CE-UV 成功地实现了无机汞和甲基汞化合物的形态分析。 5、研究状况 5、研究状况 YOUR SITE HERE LOGO * LOGO 1.概述 2. 毛细管电泳技术的原理 3. 毛细管电泳技术的特点 4.