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毛细管电泳 ?Capillary Electrophoresis? 概 念 特 点 毛细管电泳的基本原理 电泳分离的基础 毛细管电泳 毛细管电泳装置 毛细管电泳的分离模式与应用 细管区带电泳 ?capillary zone electrophoresis, CZE? 毛细管凝胶电泳 ?capillary gel electrophoresis, CGE? 毛细管等速电泳 ?capillary isota- chophoresis, CITP? 毛细管等电聚焦 ?capillary isoelectric focus, CIEF? 细管区带电泳 毛细管凝胶电泳 毛细管等速电泳 毛细管等电聚焦 毛细管电色谱 填充柱毛细管电色谱。基于填充柱的电色谱是各种电泳中最新出现的一种技术。它是利用电渗透驱动极性溶剂通过反相高效液相色谱毛细管柱，利用试样在两相的分配进行分离。 胶束电动毛细管色谱。是在缓冲溶液中加入浓度高于胶束临界浓度的表面活性剂。胶束相在分离中起到了准固定相的作用，电中性的有机化合物按照它们在水相和有机相之间分配系数的差异进行分离。该方法也可用来改善带电有机化合物的分离选择性。 毛细管电动色谱的优点 像高效液相色谱，能够分离不带电荷的物质。 像毛细管电泳法，不需要压力泵系统的情况下，提供了微量体积试样溶液的高效分离?通过电渗流泵，而不是通过机械输送流动相通过固定相的。明显地简化了输送体系。 电渗泵产生的是塞子式流动轮廓，而不是流体动力学轮廓，因此毛细管电色谱的分离柱效比高效液相色谱法高。 * * 电泳 ?electrophoresis? 是指溶液中带电粒子在电场作用下发生迁移的电动现象。 毛细管电泳 ?capillary electrophoresis? 是利用被分析离子在电场作用下移动的速率不同而达到分离的目的，这种技术主要用来分析在毛细管缓冲溶液中能离解为离子的物质。 毛细管电色谱 可以分离离子和中性分子。它是利用缓冲溶液的电渗流作为泵，使被分析的分子通过对其具有不同保留程度的第二相，达到分离的目的。 瑞典化学家Tiselius建立了“移界电泳”，成功地将人血清中的蛋白质分为5个主要成分，为蛋白质化学的发展奠定了基础。 诺贝尔奖 优点: 操作简单，试样量少，分离效率高，成本低等。 在迁移时间上的重现性，进样的准确性和检测灵敏度方面比高效液相色谱法稍逊。 ? = ?eE ? 为离子移动的速度? ?e为电泳迁移率? E为毛细管柱进样端至检测窗口间电场强度。 离子的电泳迁移率不同，在电场中移动的速度不一样，利用这个原理可以把不同的离子彼此分离。电泳迁移率与分析物质所带电荷呈正比，与摩擦阻力系数呈反比。如果两种物质带有不同的电荷或者通过缓冲溶液移动的摩擦力不同，那么这两种物质可以彼此分离。 电荷-尺寸 只有一个相！！！ ?1? 离子移动的速率 ? = ?eE = ?eU/L U是毛细管柱两端施加的压力? L是毛细管柱总长。 采用高电压可以达到使离子迅速移动和快速分离。 ?2? 毛细管电泳中的板高 N = ?eU/2D 由于分离度随塔板数的增加而增加，因此为了获得高的分离度应采用高电压。 在凝胶板形电泳中，一般最高使用的电压约为500 V。 在毛细管电泳中，一般可采用20,000 ~ 60,000 V的高电压。 ?3? 电渗流 在电泳过程中还存在另一种电动现象，即电渗。当高电压通过含有缓冲溶液的毛细管柱时，管内的溶质向阴极或阳极移动，产生电渗流。在柱内层氧化硅与溶质的界面上形成双电层是电渗流产生的原因。 在典型的毛细管电泳分离中，若有电渗存在，离子的洗脱顺序是: 首先是最快的阳离子，紧接着是依次减慢的阳离子，然后是全部的中性分子在一个区域出现，最后是最慢的阴离子，紧接着的是依次加快的阴离子。 一般在一根长 40 ~ 100 cm, 内径 10 ~ 100 ?m 的毛细管柱中充入缓冲溶液，柱的两端置于两个缓冲池中。在两个缓冲池之间的毛细管接有两个铂电极。试样从一端进入，而检测器则在另一端。使用的高电压可以反相，以能分析阴离子。 一般的进样方式是电动进样和压力进样。 电动进样是将毛细管柱的一端及其相应端的电极从缓冲池中移出，放入试样杯中，然后在一准确时间范围内施加压力，使试样因离子移动和电渗流进入毛细管柱。 压力进样是用压差使试样溶液进入毛细管。产生压差的办法可以采用在检测器端抽真空，或者通过提高试样端液面。 是基于试样中各个组分间荷质比的差异进行分离的。这种电泳模式的特征是整个系统都用同一种缓冲溶液充满。背景电解质的浓度一