舒郁胶囊对抑郁症肝气郁结证模型大鼠海马作用靶点基因筛选及5-HT受体相关基因差异表达的验证To verify the expression of Shuyu capsule associated gene differences on receptor gene screening and 5-HT in hippocampus of rats target depression of liver qi sta.pdfVIP

摘 要 目的：用基因芯片检测抑郁症肝气郁结证模型大鼠海马内5-HT受体相关基 因的表达变化，初步探讨抑郁症肝气郁结证对海马内5-HT受体的作用机制，并 研究调肝方药舒郁胶囊和柴胡皂苷对该病证的干预作用。 方法：旷场试验筛选大鼠，采用慢性温和应激法（CMS）复制抑郁症肝气郁 结证大鼠模型，模型评价采用糖水偏好实验、旷场试验等。以西药氟西汀为阳性 药，并用调肝方药舒郁胶囊和柴胡皂苷进行干预。采用基因芯片检测大鼠海马内 差异基因表达情况，比较模型组大鼠、正常组大鼠、舒郁胶囊干预组大鼠、柴胡 皂苷干预组大鼠与氟西汀干预组大鼠之间的差异表达基因；用实时荧光定量PCR 技术验证5-HT受体相关基因差异表达结果的可靠性。 结果：造模刺激4周后，与正常组相比，模型组旷场实验得分有显著性减少 （P0.01）。与模型组相比，舒郁组、氟西汀组和柴胡组的得分均有显著性增加 (P0.01，P0.001，P0.05)，但三组之间比较没有显著性差异（P0.05）。模 型组大鼠糖水摄入量较正常组、舒郁组及氟西汀组显著降低（P0.05，P0.05， P0.01），说明抑郁症肝气郁结证模型成功，而舒郁胶囊和氟西汀能明显对抗抑 郁大鼠糖水摄入量的减少，但两者之间没有显著性差异（P0.05）。柴胡皂苷不 能明显改善抑郁大鼠糖水摄入量的减少，但也有一定的作用趋势。采用含有 41000个己知基因的大鼠全基因组芯片检测大鼠海马内差异基因表达情况，结果 显示模型组、正常组、舒郁组、柴胡组与氟西汀组之间的Htr1a, Htr5b, Htr2c, Htr3a基因存在差异表达。实时荧光定量PCR方法分别检测了 Htr1a, Htr5b, Htr2c, Htr3a的表达情况，检测结果与基因芯片的结果基本一致，验证了4个 目的基因结果的可靠性。 结论：采用CMS法可以成功制备抑郁症肝气郁结证大鼠模型，糖水偏好实验、 旷场试验均可评价模型的有效性。各组大鼠海马中Htr1a, Htr5b, Htr2c, Htr3a 差异表达，可能是抑郁症肝气郁结证发病的中枢机制之一；中药舒郁胶囊和柴胡 皂苷可以有效纠正上述基因表达异常的状态，可能是药物治疗该病症的机制之 一。 关键词：抑郁症肝气郁结证； 5-羟色胺受体；基因芯片；实时荧光定量PCR； 舒郁胶囊；柴胡皂苷 Verificate and analyse the effects of Shuyu capsule on the expression of 5-HT receptors in model rats of Liver Qi depression with gene chip by real time PCR Specialty: Pharmacology of Traditional Chinese Medicine Tutor: Hui-yun Zhang Author: Hang Jin Abstract Objective: Our aim is to detect the relationship between 5-HT receptors gene expression changes in hippocampus of model rat with liver-qi depression, which gives a preliminary discussion on the pathogenesis of depression emotion, as well as studies the effects of Shuyu capsule Radix Stellaviae. Methods: After being chosen ，liver-qi depression model rats were prepared by using chronic mild stress （CMS ）method. And then the rats were evaluated by sucrose preference test and open field test. We used fluoxetine as mas