古抑菌素A对肝癌细胞HepG2中抑癌基因FHIT表达的影响 (1).pdfVIP

泸州医学院学报 2011年 第 34卷 第4期 352 JournalofLuzhouMedicalCollege Vo1．34 No．4 2011 古抑菌素A对肝癌细胞 HepG2中抑癌基因FHIT 表达的影响冰 王 丽 ，段承刚，梅志强 ，甘 淋 ，何 涛 (泸州医学院医学基础研究中心 ，四川泸州 646000) 摘 要 目的：探讨去乙酰化转移酶抑制剂古抑菌素A(trichostatinA，TsA)对人肝癌 HepG2细胞生长的作用以及 FHIT表达 的影响。方法 ；体外培养人肝癌细胞株 HepG2，分为对照组和不同浓度 (5、50、250、500、1000nmol／L)TSA组，作用 24h和 48h后 在倒置显微镜下观察细胞形态改变 ，CCK-8法检测 TSA对 HepG2细胞增殖的影响，实时荧光定量 RT—PCR法检测 FHIT基 因的表达 。结果：倒置显微镜下，经 TSA处理的细胞增殖速度显著减慢 ，出现凋亡早期改变 ，与对照组相比，TSA可明显抑制 HepG2的增殖 ，且呈时效和剂量依赖关系(尸O．01)，荧光定量 PCR结果显示 TSA可以使 FHIT表达上调(尸O．O1)。结论 ：TSA对 肝癌 I-IepG2细胞体外生长有明显抑制作用 ，可能与促进 FHIT表达有一定关系。 关键 词 脆性组氨酸三联体 ；古抑 菌素 A；肝癌 ；实时荧光定量 RT-PCR 中图分类号 R735．7：Q503 文献标识码 A 文章编号 1000—2669(2011)4—0352—04 EFFECT oF TIUCHOSTATIN A oN FHIT GENE EXPRESSION D HUMAN HEPAToMA CELL LINE HEPG2 WangLi，etal ResearchCenterforPreclinicalMedicine，LuzhouMedicalCollege Abstract0bjective：Toinvestigatethegrowth—inhibitoryeffectoftrichostatinA (TSA1onproliferationand expressionoffragilehistidinetriad (FHIT)inhumanhepatomacellstrainHepG2．Methods：Culturedcellswere dividedintocon~olgroupandTSAgroup，andtreatedwithDMSOanddifferentconcentrationofrISA(5，50，250， 500．1000nmol／L)respectively．Thecellswerecollected24and48hourslaterandcellmorphologywasobserved byinvertedlightmicroscope．ThentheeffectofTSA oncellactivitywasobservedbyCCK8andtheexpressionof FHITwasanalyzedbyusingreal-timeRT-PCR．Results：Underinve~edlightmicroscope，theearlyapoptosisof HepG2cellswasobservedandtheproliferationofHepG2cellwasinhibited significantlyaftertreatmentofI’SA． Comparedwithcontrolrgoup，TSA inhibitedtheproliferationofHepG2cellsindose—dependentandtime—depen- dentmannerslPQ．o1)．TheexpressionofFHITmRNAwasincreased(PQ．o1)．Conclusion：TSAcan