骨髓基质细胞及其上清液侧脑室移植对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤海马神经元的作用研究.pdfVIP

目 录 1 骨髓基质细胞及其上清液侧脑室移植对新生大鼠缺氧缺血性 脑损伤海马神经元的作用……………………………………1 1．1 中文摘要………………………………………………………1 1．2 英文摘要………………………………………………………4 1．3 前言……………………………………………………………8 1．4 材料与方法……………………………………………………10 oo oooeeoooeooooooo oooe e18 1．5 结果………………………………………o 1．6 讨论……………………………………………………………24 1．7 结论……………………………………………………………31 1．8 参考文献………………………………………………………32 1．9 英汉缩略词对照表……………………………………………37 2 致谢……………………………………………………………38 骨髓间充质干细胞移植治疗缺氧缺血性脑损伤的现状及进展 3 (综述)………………………………………………………39 ，㈤㈣I删㈣㈣mm㈣ }Y1 骨髓基质细胞及其上清液侧脑室移植对新生大鼠缺氧缺血性脑损 伤海马神经元的作用 摘 要 目的：探讨缺氧缺血对新生大鼠海马神经元与学习记忆的影响，及骨 marrowstromal 髓基质细胞(bone 其的治疗作用。方法：取7日龄健康SD新生大鼠90只，其中10只取股骨骨髓， 80只新生鼠随机分为假手术组、模型组、细胞组和上清液组各20只。模型 组新生鼠在无菌环境下结扎左侧颈总动脉，术后护理2小时后置于三气培养 brain 作新生鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic—ischemic 型，继续母鼠喂养1w后(14日龄)，新生鼠经低温麻醉，固定于脑立体定位． 仪下，酒精消毒后切开皮肤暴露颅骨，3％H：0：祛除骨膜，明确解剖位置，在～ u 一2mm)为移植点，用微量进样器缓慢注入21无菌0．01M的PBS液，术后缝 合皮肤、消毒、25。C室温下复苏，母鼠喂养。细胞组用体外无菌培养的经 BrdU标记的BMSCs(浓度为10j／u1)代替0．01M的PBS液，其余同模型组。 型组。假手术组仅暴露弄i侧颔总动脉，但不结扎，并且不放入三气培养箱 1c 缺氧，其余同模型组。静纠【人鼠在侧脑室注射术后8周，进行为期1J的 lI， 对位探奄训练时大鼠药．1If，J、象限的搜索时间(T2)。水迷宫测试结瓜‘lj 大鼠经409／L多聚甲醛灌注固定、取脑、石蜡包埋，经海马平面作冠状切片 u (片厚5m)。各例大鼠大脑切片分别做神经元的特异性标记——特异烯 醇化酶(neuron．specific acidic fibrillary 维酸性蛋白(glial SY)免疫组化染色，细胞组大鼠大脑切片并做BrdU免疫组化染色。各切片 在400倍下用OLYMPUS 水迷宫实验显示模型组大鼠T