高丙酮酸黄原胶发酵与流变特性研讨.pdfVIP

发酵工程学科的进展 ——第四次全国发酵工程学术讨论会论文集 高丙酮酸黄原胶发酵与流变特性研究 秦志刚，吴剑荣，郑志永，冯 杰，詹晓北 (江南大学生物工程学院，无锯Z14036) 摘要：本文研究了一种高丙酮酸含量黄原胶的发酵生产与其漉交学特性，发现黄原胶平 均分子量和丙酮酸含量均随发酵时间变化，并在对数生长期结束时都达到最大，其中最大平 均分子量为6．0×10‘。丙酮酸畲量为5．9％．黄原胶平均分子t和丙酮酸含量对黄原胶溶液 的漉变行为有明显影响I在电解质(KCl)溶液中丙酮酸含量越高，黄原胶粘度越大假塑性越 好，且高丙酮酸黄原胶具有低浓度下高粘度的特性． 关键词：黄原胶，发酵，分子量，丙酮酸，流变特性 黄原胶(Xanthangum)是一种具有重要工业应用价值的微生物多糖，它是由黄单胞 杆菌(Xanthomonas campestris)以碳水化合物为主要底物经发酵而成的高分子胞外杂多 糖。它的基本结构是五糖重复单元，在以D一葡萄糖以p—D一1，4一葡萄糖苷键连接的 纤维素主链上，由一个葡萄糖醛酸残基夹在两个甘露糖单位中间组成三糖侧链，以糖苷 键交替连与葡糖单位的3--0--位上，乙酸以酯的形式连与侧链内部的甘露糖上，而丙酮 酸与末端的甘露糖缩合成缩酮。其平均分子量、乙酰基和丙酮酸的含量不仅与菌种密切 相关[1’幻，而且不同的发酵条件c33对其也有重要影响。 黄原胶溶液具有良好的增粘性、触变性和假塑性，并对温度、高浓度盐和强酸碱有很 强的适应能力。它的流变学特性不仅与黄原胶的平均分子量和分子量分布“]有关，还与 其分子中乙酰基[53和丙酮酸基团[6]含量有关。本文研究了高丙酮酸含量黄原胶的发酵 动力学，主要考察发酵时间对黄原胶分子量和丙酮酸含量的影响，并探讨了分子量和丙 酮酸基团与黄原胶流变特性之间的关系。 1 材料与方法 1．1材料 出发菌种：X口竹旃o，，lD，l口s WXBCLZ0403验室保存。 campestris 培养基： 斜面培养基(g／L)：蔗糖20；蛋白胨5；牛肉膏3；酵母膏1；琼脂20)pH7．o～7．2 种子培养基(g／L)：蔗糖20；蛋白胨5；牛肉膏3；酵母膏1)pH7．o～7．2 2．5I酵母膏1；硫酸亚铁0．01；硫酸镁2．5；Ca— 发酵培养基(g／L)：淀粉50)NH。C1 C03 6；pH7．0-,7．2 作者简介：詹晓北，1958年出生，教授，博士生导师． 秦志刚等：高丙酮酸黄原胶发酵与流变特性研究 沉淀，上清液用1％KCI透析，将黄原胶转化为钾盐形式的黄原胶，再用去离子水反复透 析，最后冷冻干燥。 1．2细胞培养 将保存在4℃的斜面种子划线培养在琼脂平板中，挑取黄亮且饱满的单菌落接种到 种到装有30ml发酵培养基的250mi三角瓶中，于220r／rain的摇床29℃下恒温培养 72h。 1．3分析方法 所有分析用发酵液在取样后立即离心将菌体除去。根据发酵液的粘度，将其用1％ 淀溶于一定体积去离子水中进行生物量的测定，最后将收集的上清液收集进行还原糖、 产胶量、残留铵盐以及丙酮酸含量的分析。 1．3．1生物量测定 将上述沉淀溶于去离子水中，添加少量盐酸，再离心弃上清液，将菌体沉淀溶于去离 子水中，于650nm下测OD值并计算生物量干重。 1．3．2产胶率测定 DV—E 发酵液中黄原胶小于39／L时，通过发酵液粘度和胶含量的关系用Brookfied 粘度计1号转子于100r／min下测发酵液粘度来确定产胶率啊；其他情况下将上清液用约 真空干燥24小时称干重，计算黄原胶产量。 1．3．3 还原糖测定 取少许发酵液用KI--12溶液测试发酵过程中淀粉水解情况}发酵液中还原糖的测定 采用3，5一二硝基水杨酸(DNS)比色法。 1．3．4残留氨态氮测定 本实验发酵所用氮源主要为氯化铵，采用水杨酸钠一次氯酸钠比色法测定发酵液中 残留氨态氮。 1．3．5丙酮