枳抗逆基因PtrZPT2-2的克隆与表达分析.pdfVIP

园 艺 学 报 2014 ，41 （1）：9 –16 http：// www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail ：yuanyixuebao@126.com 枳抗逆基因 PtrZPT2-2 的克隆与表达分析 * * ** 刘德春 ，吴 启 ，王玥辰，刘山蓓，刘 勇 （江西农业大学农学院园艺系，南昌 330045 ） 摘 要：通过电子克隆和 RT-PCR 法从枳[Poncirus trifoliata （L. ）Raf.]中克隆到 1 个 C2H2 型锌指蛋 白家族基因，命名为PtrZPT2-2 。该基因编码 159 个氨基酸残基，预测蛋白分子量为 17.28 kD，等电点为 9.51 。PtrZPT2-2 包含两个 C2H2 型锌指结构域，在其 C –末端含有一个转录抑制结构域EAR/DLN-box （DLNL ）。PtrZPT2-2 与其他植物参与各种非生物胁迫反应的 C2H2 型锌指蛋白有较高的一致性。系统发 育树分析表明 PtrZPT2-2 与杨树 PtaZFP2 ，矮牵牛ZPT2-12 、ZPT2-13 ，拟南芥ZAT12 、ZAT7 亲缘关系较 近。半定量 PCR 分析表明，低温、高盐、干旱胁迫和 ABA 处理下枳叶、茎、根中 PtrZPT2-2 均被诱导上 调。PtrZPT2-2 可能在枳适应低温、高盐、干旱等非生物胁迫和 ABA 响应中起着重要作用。 关键词：枳；C2H2 型锌指蛋白；PtrZPT2-2 中图分类号：S 666 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2014 ）01-0009-08 Cloning and Expression Analysis of PtrZPT2-2 from Trifoliate Orange （Poncirus trifoliata ） * * ** LIU De-chun ，WU Qi ，WANG Yue-chen ，LIU Shan-bei ，and LIU Yong （Department of Horticulture ，College of Agronomy，Jiangxi Agricultural University ，Nanchang 330045 ，China ） Abstract ：In the present study ，a novel C2H2-type zinc finger protein gene，PtrZPT2-2 ，was cloned from trifoliate orange by in silico and RT-PCR approaches. The PtrZPT2-2 encodes a protein of 159 amino acid residues with a predicted molecular mass of 17.28 kD and an isoelectric point of 9.51. The PtrZPT2-2 protein contains two C2H2-type zinc finger domains ，and a putative transcription repression domain （EAR/DLN-box ）at the C-terminus. Phylogenetic analysis showed that the PtrZPT2-2 clustered with PtaZFP2 ，ZPT2-12 ，ZPT2-13 ，ZAT12 and ZAT7. PtrZPT2-2