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项目二 核酸的结构与功能
项目二 核酸的结构和功能 五种碱基都能形成酮式-烯醇式或氨基-亚氨基的互变异构。这两种异构体的平衡关系受介质酸碱环境的影响。 二、核酸的一级结构 定义 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同,所以也称为碱基序列。 DNA 与RNA的区别 (二)DNA双螺旋结构的多样性 B型DNA双螺旋是核酸二级结构的重要形式。当改变了溶液的离子强度和相对湿度时,DNA螺旋结构可以改变,除B型外,还有Z型及A型。 在体内,不同构象的DNA可能与基因表达的调控有关。 三种类型DNA双螺旋的比较 三、DNA的功能 肺炎双球菌的转化实验 1928年,格里菲斯:实验表明加热杀死的S型细菌把某些R型细菌转化为S型细菌,S型细菌有一种物质或转化因素进入了R型细菌,使之产生了荚膜,从而具备了毒性。 1944年,艾弗里和他的同事经过10年努力,在离体条件下完成了转化过程,证明了引起R型细菌转化为S型细菌的转化因子是DNA。 实验二,噬菌体的标记实验 T2噬菌体是一种专门寄生在细菌体内的病毒,约由60%的蛋白质和40%的DNA组成。蛋白质构成它的外壳,DNA藏在头部,当一个T2噬菌体感染细菌后,在菌体内形成大量噬菌体,菌体裂解,释放几十个至几百个跟原来一样的噬菌体。那么T2噬菌体的遗传物质究竟是蛋白质还是DNA呢? 噬菌体T2结构 * tRNA的一级结构特点 含稀有碱基较多 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 由70~90个核苷酸组成 tRNA的三级结构—倒L形 三、rRNA的结构与功能 rRNA是细胞中含量最多的RNA,占总量的80%。rRNA与蛋白质一起构成核蛋白体,作为蛋白质生物合成的场所。 解链曲线:在连续加热DNA的过程中以温度对A260值作图,所得的曲线称为解链曲线。 热变性的DNA在复性过程中,具有碱基序列部分互补的不同的DNA之间或DNA与RNA之间形成杂化双链的现象。 复习题 1、概念(1)核酸的一级结构 (2)解链温度(Tm) (3)DNA分子变性 (4)核酸分子杂交 2、碱基与核糖、核糖与磷酸及核苷酸之间各以何种键连接? 3、简述RNA与DNA的主要不同点。 4、B型DNA 双螺旋结构要点。 5、真核生物mRNA的结构特点。 6、tRNA一、二、三级结构各有哪些特点? 7、试述RNA的种类及其主要功能。 第五节 核 酸 酶 肺炎双球菌的转化实验 Oswald Avery (1944) DNA、蛋白质、荚膜 1928年,格里菲斯 头部 颈圈 尾部 基板 尾丝 尖钉 DNA 第三节 RNA的结构与功能 动物细胞内主要RNA的种类及功能 一 、信使RNA的结构与功能 hnRNA 内含子 mRNA * mRNA成熟过程 外显子 * mRNA结构特点 1. 大多数真核mRNA的5′末端均在转录后加上一个7-甲基鸟苷,同时第一个核苷酸的C′2也是甲基化,形成帽子结构:m7GpppNm2。 2. 大多数真核mRNA的3′末端有一个多聚腺苷酸 (polyA)结构,称为多聚A尾。 帽子结构 二、转运RNA的结构与功能 稀有碱基 * tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 额外环 5’ 3’ * tRNA的三级结构 —— 倒L形 * tRNA的功能 活化、搬运氨基酸到核糖体,参与蛋白质的翻译。 * tRNA的功能 活化、搬运氨基酸到核糖体,参与蛋白质的翻译。 核糖体的组成 49种 33种 蛋白质 80S 70S 核糖体 28S 5.8S 5S 23S 5S rRNA 60S 50S 大亚基 33种 21种 蛋白质 18S 16S rRNA 40S 30S 小亚基 真核生物 原核生物 rRNA的结构 右图:真核生物18S rRNA的二级结构 三、核蛋白体RNA的结构与功能 * rRNA的功能 参与组成核蛋白体,作为蛋白质生物合成的场所。 核酸的理化性质 第 四 节 一、核酸的一般理化性质 核酸为多元酸,具有较强的酸性; DNA是线性高分子,粘度极大; 在260nm波长有最大吸收峰,是由碱基的共轭双键决定的。这一特性常用作核酸的定性、定量分析。 二、DNA的变性 定义:在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。 变性因素:过量酸,碱,加热;尿素、甲醛等试剂。 变性后理化性质的主要改变: OD260增高 粘度下降 DNA变性的本质是双链间氢键的断裂 DNA的紫外吸收光谱 增色效应:DNA变性时其溶液OD260增高的现象。 Tm:紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度,又称融解温度。其大小与G+C含量成正比。 三、DNA的复性与分子杂交
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