生物化学与分子生物学（南方医科大学）DNA的生物合成-2.pptVIP

小 结 DNA复制的特点 DNA复制过程中重要酶及蛋白因子的作用 DNA复制分三个阶段 突变的类型 DNA损伤修复类型 逆转录酶的特点 * 思 考 题 名词解释： 基因，中心法则，半保留复制，半不连续复制，复制子，冈崎片段，端粒酶，移框突变，逆转录 DNA复制有哪些特点？ 列表说明参与复制起始的各种蛋白质及其功能 简述DNA损伤的修复机制 * 突变检测技术 单链构象多态技术(SSCP) 变性梯度凝胶电泳(DGGE) 杂合双链分析(HTX) 蛋白截短试验（PTT） 化学错配裂解法(CCM) 酶错配裂解法(EMC) 毛细管电泳(CGE) 变性高效液相色谱分析(DHPLC) 碱基切割序列扫描(BESST-ScanTM) DNA芯片技术(DNAchips) 测序法(Sequencing) * * * * * * * * * * * * * * * 14歲的傑洛米?邱吉患有遺傳疾病「著色性乾皮病」，這種病的患者對紫外線完全沒有抵禦力。由於紫外線會引發嚴重水泡，皮膚癌和DNA損害，因此傑洛米必須努力避免暴露在紫外線下。著色玻璃與25瓦特燈泡能減少他在家裡所受的威脅。白天外出時，他會穿著由美國國家航空太空總署製作的連身裝（造價2000美元）與滑雪護目鏡。對著色性乾皮病患者來說，DNA損害會累積導致皮膚癌與眼癌。 * * * L o g o 第三篇 基因信息的传递Genetic Information Transfer * 4.1 逆 转 录(Reverse Transcription) 逆转录：以RNA为模板生成DNA的过程 逆转录酶（Reverse transcriptase) * 逆转录酶 DNA聚合酶活性 RNA dependent（依赖于RNA的） DNA dependent（依赖于DNA的） RNA酶H活性（ RNase H activity ）：水解DNA-RNA杂化双链中的RNA * 逆转录病毒细胞内的逆转录现象 RNA 模板 逆转录酶 DNA-RNA 杂化双链 RNA酶 单链DNA 逆转录酶 双链DNA * 逆转录研究的意义 for their discoveries concerning the interaction between tumour viruses and the genetic material of the cell Howard Martin Temin December 10, 1934 ～ February 9, 1994 Nobel Prize in Physiology or Medicine 1975 David Baltimore Mar 7, 1938～ Renato Dulbecco February 22, 1914～ * 试管内合成cDNA cDNA(complementary DNA)： 以mRNA为模板，经逆转录合成的与mRNA碱基序列互补的DNA链。 * 分子生物学研究可应用逆转录酶，作为获取基因工程目的基因的重要方法之一，此法称为cDNA法。 * 小 结 DNA复制的特点： 半保留式，半不连续性，方向性 双向复制，复制叉，复制泡 DNA的复制过程中多种酶与蛋白因子的作用 了解DNA复制过程：起始、延伸、终止 重要概念： 半保留复制、复制子，冈崎片段，端粒酶，逆转录 * DNA损伤（突变）与修复 DNA Damage (Mutation) and Repair * 从分子水平来看，突变就是DNA分子上碱基的改变。 突变(mutation):可以通过复制而遗传的DNA结构的任何永久性改变,也称为DNA损伤(DNA damage) * 一、突变的意义 （一）突变是进化、分化的分子基础 （二）突变导致基因型改变 （三）突变导致死亡 （四）突变是某些疾病的发病基础 * 二、引发突变的因素 物理因素 紫外线(ultra violet, UV)、各种辐射 UV * 短期检测方法 化学诱变剂的细菌检测法(Ames)试验 细胞遗传学检测法 致畸试验 Ames试验： 实验组：his-菌株，不含his的培养基，待检物 阴性对照组：his-菌株，不含his的培养基，不含待检物 “三致因子”(致突变、致畸、致癌)的检出 * * * 三、突变的分子改变类型 错配 (mismatch) 缺失 (deletion) 插入 (insertion) 重排 (rearrangement) 框移 (frame-shift) * DNA分子上的碱基错配称点突变(point mutation)。 发生在同型碱基之间，即嘌呤代替另一嘌呤，或嘧啶代替另一嘧啶。 1. 转换 发生在异型碱基之间，