ng与少突状胶质细胞医学幻灯片教材.pptxVIP

在EAE中，NG2与神经炎症、血脑屏障改变、OPCs反应及DCs激活有关 Moransard 等人研究EAE在NG2KO mice的作用，发现与WT mice并没有发现任何差异 而本作者采用通过样的方法，发现NG2在EAE中发挥着重要的作用实验方法 工具1.ELISA---酶联免疫吸附试验2.EAE 建模方法3.工具鼠4.bone marrow chimeramouse5.血管内皮通透性试验1.ELISA---酶联免疫吸附试验OD在EAE中，NG2与神经炎症、血脑屏障改变、OPCs反应及DCs激活有关 Introduction1.NG2-硫酸软骨素蛋白多糖，OPCs和激活的周细胞表达，NG2、PDGFRα 是OPCs（ NG2 cell ）的marker，当其分化成少突状胶质细胞时，这两个marker不表达 ①CNS损伤时，OPCs反应性增殖，表达NG2的细胞在炎症部位聚集 ②EAE and MS，急性期，OPC的数量显著增加，在慢性后期中，显著减少 ③OPCs分化为少突状胶质细胞，促进髓鞘的生成 ④CNS微血管中，周细胞促进血管生成，促进紧密连接的形成，从而保护BBB通透性和维持内皮细胞屏障的功能； CNS损伤时，充当炎症传感器，免疫监视，执行中性粒细胞 巨噬细胞的功能2.表明NG2与CNS损伤的炎症息息相关 胶质瘢痕 :①由于缺氧、低血糖、感染、中毒等均能引起脑组织的损伤而导致星形胶质细胞增生。反应性星形胶质细胞增生是脑组织损伤的修补反应②减弱星形胶质细胞增生，有利于改善脑缺血后神经功能恢复 胶质瘢痕形成是一个极其 复杂的病理生理过程，包括组织水肿、炎症反应、局 部缺血、谷氨酸受体高反应性、脂质过氧化作用、钙离子超负荷、自由基损伤、反应性星形胶质细胞增生 EAE BBB渗透性改变的疾病 3.NG2 炎症浸润 CNS损伤有关 4.NG2KO mice ，EAE的临床表现型更轻微 Unexpectedly，NG2有助于EAE的发病机制 OPCs及周细胞表达NG2原因 免疫细胞也表达NG2Abstract在成年人的CNS中，OPCs表达NG2在病理情况下，NG2是周细胞激活的marker EAE BBB渗透性改变的疾病 NG2 炎症浸润 CNS损伤有关研究思路？Results1.NG2KO mice 的EAE表现型更轻微2.NG2KO mice骨髓中，EAE相关的炎症更轻微3.EAE induced NG2KO mice，OPCs的数量无改变4. EAE induced NG2KO mice，紧密蛋白的连续性分布与BBB功能有关5.免疫细胞表达NG26. NG2KO mice ,T细胞对MOG反应，炎症较少7. NG2KO mice，IL-12表达较少NG2参与DC的激活8.NG2不参与巨噬细胞的极化 9. NG2KO mice ,可调节的免疫反应保守的BBB导致了EAE轻微的表现型1.NG2KO mice 的EAE表现型更轻微A representative of three independent experiments is presented disease incidence (84 ± 4.5 vs. 100 % in WT mice) Disease onset was delayed (13.06 ± 3.66 vs. 8.16 ± 1.71 days for WT mice) 26/33 ×100%=78.78%A representative of three independent experiments is presented CD45：血管周浸润的炎性细胞，巨噬细胞CoII IV :microvessel basal laminaTO-PRO-3：细胞核脊髓截面染色小胶质细胞巨噬细胞激活的星形胶质细胞Stress marker-positive cells 浸润的T细胞大脑皮层脊髓2.NG2KO mice骨髓中，EAE相关的炎症更轻微EAE相关的促炎性基因的mRNA的表达情况3.EAE induced NG2KO mice，OPCs的数量无改变EAE and MS，急性期，OPC的数量显著增加，在慢性后期中，显著减少（脱髓鞘过程中） Whether NG2 缺失影响少突状胶质细胞的免疫反应？ 首先要证明NG2是不存在的或不生成 免疫荧光定量分析OPCs数量 确定PDGFRα确定NG2的确敲除了，且在NG2KOmice中不表达EAEthe insertion of a 1100-bp neomycin-resistance在NG2KO mice中，NG2特异性的信号没有被发现（基于NG2敲除的前提下，理解为没有生成），实验更加严谨---------IFN-γ研究NG2缺失EAE免疫荧光定量分析