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VII. 工作站 MassHunter 软件 在线质谱图 方法编辑器 序列编辑器 仪器状态 极性切换, 离子化模式, 扫描模式选择 内 容 LC/MS构造及工作原理 注意事项 应用实例 注意事项 流动相： （1）不挥发性的盐或酸 （2）正负模式选择于流动相之间的关系 离子源的选择：极性? HPLC图谱不能与质谱离子流完全对应！ QQQ局限性: (1)异构体，立体化学方面区分能力差。 (2)重复性稍差，要严格控制操作条件。 (3)有离子源产生的记忆效应，污染等问题。 (4)价格稍显昂贵，操作有点复杂。 内 容 LC/MS构造及工作原理 注意事项 应用实例 具有拒食和胃毒作用的活性物质 肝毒性 药典 Scan 广东产千里光药材中总生物碱的总离子流图 广东产千里光药材中总生物碱的总离子流图 SIM PI 野百合碱 阿多尼弗林碱 去氢克氏千里光碱 克氏千里光碱 建立定量方法的一般步骤 前提： 待测化合物的信息：结构、分子量等 待测化合物的对照品 待测样品的特点 流动相 分离条件 建立定量方法的一般步骤 在单个样品模式，用质谱2扫描注射样品 在定性软件中，为每个目标化合物选择母离子。 建立一个流动注射分析程序，找出无 CID时母离子传输的最终碰撞解离电压 。在定性软件中选择。 找到最佳的碰撞能量，得到期待的用于定量的子离子，包括一个辅助定量离子。一个丰富的质谱图应该有至少一个特征离子 和一个辅助定量离子 建立一个分时间段的方法，使每个目 标化合物都可以得到一个MRM quan 和最少一个辅助定量离子，最好 有两个。 sulfamethazine Full scan 中药质量控制研究专题之一 LC/MS在中药质量控制研究中的应用 LC/MS 主要应用 生物药学 (生物大分子) 药物研究：（ 获取分子量信息、未知物的结构鉴定、 杂质和降解产物的确定、 品质控制） 药代动力学研究（非临床、临床） 内 容 LC/MS构造及工作原理 主意事项 应用实例 内 容 LC/MS构造及工作原理 注意事项 应用实例 LC/MS 离子光学组件 质量分析器 检测器 样品引入 工作站 真空系统 质谱部分 LC I. 离子源: 使被分析样品的原子或分子离子化为带电粒子(离子)的装置，并对离子进行加速使其进入分析器。 EI(Electron Impact Ionization)：电子轰击电离—硬电离。 CI(Chemical Ionization)：化学电离—核心是质子转移。 MALDI(Matrix Assisted Laser Desorption)：基质辅助激光解吸电离。通常用于飞行时间质谱和FT-MS，特别适合蛋白质，多肽等大分子 大气压电离(API)：软电离，核心是电子的转移 液质的离子源： 电喷雾电离，ESI (Electrospray Ionization):—适宜极性分子的分析，能分析小分子及大分子。 大气压化学电离，APCI (Atmospheric Pressure Chemical Ionization): —更适宜做弱极性小分子。 大气压光喷雾电离，APPI (Atmospheric Pressure PhotoSpray Ionization): —同上，更适宜做非极性分子 API源：细分为如下3类 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 加热干燥氮气 反吹气 绝缘毛细管入口 喷雾器与毛细管入口成90°角 流动相喷雾 离子 -5,000 V Agilent直角喷雾API技术 喷雾气 离子光学组件 质量分析器 检测器 前级真空 高真空 3×105 II.真空系统 III. 离子光学组件 毛细管 Skimmer及八级杆 Les1、Les2 让所有离子通过，顺利进入质量分析器 保证传输的效率 保证离子传输中不发生变化 Octopole 1 Rough Pump Turbo Turbo Quad Mass Filter (Q1) Lens 1 and 2 Capillary Vacuum wall IV. 质量分析器 根据气态离子的质荷比测定 四极质谱仪(Q). 飞行时间质谱仪(TOF). 离子阱质谱仪（TRAP） 付利叶变换-离子回旋共振质谱仪(FT-ICRMS). ┏四极+TOF（Q-TOF） 串列式多级质谱仪┫三重四极杆（QQQ） (MS/MS) ┗TOF+TOF 高选择性，最高定量灵敏度 复杂基质中痕量组分定量分析的首选；多