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血浆脂蛋白的测定及临床意义
精品论文 参考文献
血浆脂蛋白的测定及临床意义
张丽杰(辽宁省铁岭卫生职业学院医学检验系生化教研室 辽宁铁岭 112000)
【摘要】血浆脂蛋白是血脂在血浆中的运输形式,密度分类法可将其分为乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白四种成分。血浆脂蛋白测定是临床上常规检测项目,是代谢障碍性疾病、动脉粥样硬化和心、脑血管疾病诊断、治疗和预防的重要指标;对高脂蛋白血症与异常脂蛋白的诊断具有重要价值。
【关键词】血浆脂蛋白 低密度脂蛋白 高密度脂蛋白 高脂蛋白血症
血脂是指血浆中脂类物质的总称。包括三脂酰甘油(TG)、磷脂(PL)、胆固醇(Ch)、胆固醇酯(CE)和游离脂肪酸(FFA)。由于脂类难溶于水,在血浆中会与载脂蛋白结合形成脂蛋白,以脂蛋白的形式运输。
用密度分类法(超速离心法)可将血浆脂蛋白分为乳糜微粒(CM)、极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)、和高密度脂蛋白(HDL)四种成分。此外,还有中间密度脂蛋白(IDL),它是VLDL在血浆中的代谢产物,其组成和密谋介于VLDL与LDL之间。正常人空腹血浆中的脂蛋白主要是低密度脂蛋白(占血浆脂蛋白总量的2/3)和高密度脂蛋白(占血浆脂蛋白总量的1/3)
血浆脂蛋白测定是临床上常规检测项目,是代谢障碍性疾病、动脉粥样硬化和心、脑血管疾病诊断、治疗和预防的重要指标;对高脂蛋白血症与异常脂蛋白的诊断具有重要价值。目前,通常以低密度蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)分别作为测定LDL和HDL浓度的间接方法。
现将这两个项目测定的原理、操作及临床意义介绍如下:
1 血清低密度脂蛋白胆固醇测定
原理:空腹血清中主要含有HDL、LDL和VLDL,用聚乙烯硫酸盐-聚乙二醇甲醚选择性地沉淀LDL,离心后上清液中含HDL和VLDL。测出上清液中胆固醇含量代表HDL-C与VLDL-C之和,同时测定血清总胆固醇,以总胆固醇减去上清液胆固醇含量即为LDL-C。
操作:1.LDL分离:于小离心管中加血清200mu;l和沉淀剂量100mu;l,混匀,置室温15分钟,然后3000rpm离心15分钟,取上清液与血清同时测定胆固醇。
2.胆固醇测定:取4支试管,分别标记后按下表操作。
加入物(ml) 标准管 测定管1 测定管2 空白管
标准液 0.03 --- --- ---
上清液 --- 0.03 --- ---
血清 --- --- 0.03 ---
蒸馏水 --- --- --- 0.03
酶试剂 2.00 2.00 2.00 2.00
混匀后,37℃保温5分钟,以空白管调零,于500nm波长处测定各管吸光度。
计算:上清液胆固醇浓度(mmol/L)= 测定管1吸光度 times;胆固醇标准液浓度
血清LDL-C(mmol/L)=TC—上清液胆固醇浓度(mmol/L)times;1.5
参考范围:2.70-3.10mmol/L
临床意义:LDL增高是动脉粥样硬化发生发展的主要脂类危险因素。目前以LDL-C为定量LDL的依据。LDL-C水平更能说明体内胆固醇的代谢情况,与冠心病发病呈正相关。
2 血清高密度脂蛋白胆固醇测定
原理:用磷钨酸与镁离子作沉淀剂,选择性沉淀LDL和VLDL,上清液中只含HDL,用酶法测定上清液中胆固醇含量,即可代表HDL-C含量。
酶法测定胆固醇的原理是:血清中的胆固醇酯被胆固醇酯酶水解成脂肪酸和游离胆固醇,后者在胆固醇氧化酶的作用下,氧化成胆烷-4-烯-3-酮,并产生过氧化氢,过氧化氢在世界范围内-氨基安替比林与酚存在下,经过氧化物酶催化,生成红色醌亚胺。颜色的深浅与标本中胆固醇的含量成正比。
操作:1.HDL的提取:于小离心管中加血清200mu;l和沉淀剂200mu;l,混匀,室温放置15分钟,
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