手性药物的生物合成技术研究.pptVIP

3.3.1 气相色谱 GC具有快速、灵敏、简便和定量准确等优点。手性GC特别适合于不对称合成的样品分析。因为分析样品一般无需衍生，反应产物可直接进样分析，用量极微（10-8g），特别适合于跟踪不对称反应的全过程。 对于那些对映体纯度 95%的产物，一般要用GC或HPLC代替旋光测定。 气相色谱手性固定相主要分为： ●??氢键型手性固定相：如某些氨基酸衍生物固定相，主要用于分离氨基酸、羧酸、醇、胺、内酯、内酰胺等对映体化合物，氢键作用是对映体分离的主要作用力 ●??形成包合物的手性固定相：环糊精衍生物手性固定相用于分离稠环烷烃、没有取代的烯烃、卤代烃、醇、醛、酮、胺、氰类、环氧化合物、羧酸、卤代酸、羟基酸、内酯和氨基酸等化合物的对映体。 手性药物的生物合成 手性分离技术 手性分离和分析的重要性 ★ 获取单一对映体化合物 ★ 对于涉及分子手性分析的领域要采用高对映体选择性的分析方法 手性分离的特殊性 在非手性环境中，对映体的物理化学性质（如熔点、沸点、折射率、蒸气压、溶解度、红外、核磁谱和质谱等）大都相同，这就造成对映体分离的困难。 1 获得单一对映体的途径 手性源(chiral pool) 合成 前手性底物 不对称合成 外消旋体 拆分 防止“外消旋化” “立体选择性”反应，如手性催化、手性诱导、生物催化 结晶法 衍生法 酶法 色谱法 ● 天然手性库：从自然界存在的光活性化合物提取得到，如氨基酸、羟基酸、糖、生物碱和萜类等为原料，采用保持原构型、转化或手性转换等方法合成手性化合物 ●??不对称合成：采用手性辅助基、手性配体、手性催化剂对前手性底物进行选择性反应 ●??外消旋体拆分：常规合成方法得到外消旋体产物，如何将它们进一步分离 2???外消旋体拆分方法 等量对映体的混合物，其旋光性相互抵消，没有旋光能力，称为外消旋体。将外消旋体分为对映体的过程，叫做对映体拆分（resolution）。广义地讲，对不等量对映体混合物进行分离，也属于对映体拆分的范畴。 2.1 结晶拆分法 ▲ Pasteur分离酒石酸对映体 1849年，Pasteur首次分离酒石酸对映体，就是利用外消旋的酒石酸铵钠在27℃以下结晶时，形成的晶体是“外消旋混合物”，两个对映体的半面晶外观不一样。Pasteur借助放大镜，用镊子将两种酒石酸铵钠晶体分开。这就是历史上有名的第一个对映体拆分实验。 图3 酒石酸铵钠晶体外型 这一方法虽然古老，但在一些特定的场合还有用处，如“手性金属配合物”。 2.2 生物拆分法 生物酶、微生物、细菌等生物源具有非常专一的反应特性。利用酶可以选择性地使外消旋体中的一个对映体发生反应，如降解，从而达到拆分的目的。因此，这一方法也称为“生物化学拆分法”。 1858年，Pasteur就观察到：外消旋酒石酸在酵母或青霉的存在下进行发酵，天然的（+）-酒石酸铵逐渐被消耗，而经过一段时间之后，从发酵液中分离出纯的（-）-酒石酸铵。这是微生物代谢了天然的（+）-酒石酸，而留下了（-）-酒石酸。 图5 D,L－苯基甘氨酸外消旋体的酶拆分 生物拆分特点：立体专一性强、拆分效率高和生产条件温和。目前，酶法拆分已从水溶液向有机介质发展。 D, L-苯基甘氨酸 (PG) (CH 3 C) 2 -O O D, L-乙酰PG L-氨肽酶 L-PG D-乙酰PG 水解 / H + D-PG D, L-PG H2SO4 / 加热 (外消旋化) 用微生物酶拆分外消旋体，比化学拆分法具有明显的优越性： （1）酶催化反应通常具有高度立体专一性； （2）副反应少，产率高，产品分离提纯简单； （3）反应条件较温和，如0 ~ 50℃，pH接近中性； （4）酶无毒，易降解，不会造成环境污染，适于规模生产。 用酶拆分外消旋体氨基酸特别重要。因为多数合成氨基酸消旋体不易用化学方法拆分，而酶法拆分却非常有效，可用于制备旋光性氨基酸。 2.3 化学拆分法 化学分离的原理：利用合适的分离性质差异来进行分离。 常见的化学分离方法： ● 沉淀与结晶：溶解度 ● 蒸馏：蒸气压 ● 萃取：分配系数 ● 色谱：分配系数 这些化学分离方法可用于对映体的拆分吗？ 化学拆分法原理 如果外消旋体的分子含有某些活性基团，如羧基、氨基、羟基和双键等，可让其与某种旋光活性的化合物（称为拆分剂）进行反应，生成两种非对映体。利用非对映体在分离性质上的差别可将其分开。换句话说，化学拆分的原理是将具有