17.从DNA到蛋白质-3.pdf

现代动物生物化学 从DNA到蛋白质 From DNA to Protein （3 ） 翻译系统 mRNA是合成蛋白质的模板，它以一系列三 联体密码的形式从DNA拷贝了遗传信息，每个密 码子代表一个氨基酸。 tRNA是遗传信号的转换器，它解读mRNA上 的密码子。每一个氨基酸有其自身的tRNA，与 其结合并转移到肽链的延伸的末端。氨基酸的正 确定位依赖于tRNA 的反密码子与mRNA的密码子 互补配对。 rRNA与多种蛋白质结合形成的复合体，即核 糖核蛋白体。它是翻译机器，可以沿着mRNA移 动，催化氨基酸聚合成多肽链。 它有大小两个亚基组成，含各自的rRNA和多种 合成蛋白质必需的酶与因子，并结合tRNA 。 蛋白质的合成需要20种氨基酸原料、ATP 、 GTP和Mg++ 遗 传 密 码 表 遗传密码的性质 上世纪60年代，Nirenberg等利用均聚核苷酸在无 细胞蛋白质合成系统中的翻译实验破译了遗传密码。 如使用polyU在得到多聚苯丙氨酸，从polyC得到 多聚脯氨酸，从polyA得到多聚赖氨酸。而用polyUG 得到的 …5’UGU GUG UGU GUG 3’…. 所对应的氨基酸序列为 …Cys Val Cys Val … 三联体密码，5’到3’ 阅读，不重叠，无标 点。即使在少数重叠基因 （如病毒）中其阅 读框架 （reading frame ）仍按此原则。 缺失或者插入一个核苷酸都会因为移码而 使基因失活。但删除或插入三个核苷酸，阅 读框架可以不变，除了突变位置以外，原来 编码的信息依旧可以表现出来。 密码有简并性 （degeneracy ） 反密码有变偶性或摆动性 （wobble ） 密码有通用性、偏爱性和变异性 一个氨基酸含有两个以上同义密码子——简并性 tRNA 的反密码子上5’端碱基的 “变偶性”决定了它所能识别的密码子的数目 tRNA 的特点 至少有4 个位点与多肽链合成有关 3’CCA羟基是接受氨基酸的位点 氨酰基-tRNA合成酶识别位点 核糖体识别位点 反密码子位点 tRNA “三叶草形”和 “四环一臂”的结构 核糖体的性质 （原核） 30S小亚基可单独与mRNA结合后，再与tRNA专一 地结合成复合体。 50S大亚基不能单独结合mRNA，但可非专一地 与tRNA结合。它含有肽酰基移位时GTP的水解位点。在 大亚基 和小亚基结合的表面上有氨酰基位点 （A位 点）、肽酰基位点 （P位点）和肽基释放位点 （E位点） 以及mRNA结合位点。 核糖体上还有起始因子、延伸因子、终止因子和多种酶。 核糖体-mRNA-tRNA复合体 核糖体的结构 rRNA的结构 核糖体中的蛋白因子 核糖体蛋白因子与tRNA 的相互作用 大肠杆菌16S rRNA与核蛋白S5的接触部位 （红色） 氨酰基tRNA合成酶 催化氨基酸的活化 氨酰基-tRNA合成酶 使原料氨基酸活化和由tRNA携带氨基酸 “对号入座”。 每一个酶可识别一个特定的氨基酸和与此对应的一个或多 个tRNA 的特定部位。 根据酶对反密码子识别的专一性，分为两类。I类，氨基酸 先连在CCA的2’位羟基上再转到3’位，II类则直接连在CCA的 3’位羟基上。 这个酶还有将不适当连接的氨基酸水解除去以纠正酰基化 错误的作用。 氨酰基-tRNA 特殊的氨基酸 （Met ）及其tRNAfmet启动了原核蛋白质的翻译 翻译的主要阶段 起始因子 原核翻译的起始 mRNA的起始密码AUG上游的S.D序列与 16S rRNA3’端互补结合有利于30S起始复合物的形成 真核翻译的起始扫描模式 40S小亚基沿着具有5’帽结构的mRNA的5’端向着3’端滑动， 直到找到AUG，最后与大亚基结合形成起始复合物。在此过 程中，5’帽和PolyA尾协同刺激翻译的起始。 大多数的真核mRNA 内部没有核糖体的结合位点。